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资料下载
赖氨酸脱羧酶培养基配制方法
点击次数: 73发布时间:2011/3/7
资料简介: 中文名称:赖氨酸脱羧酶培养基
英文名称:Lysine-decarboxylase Test Broth
保存条件:2~8℃,避光储存,拆封后及时放入冰箱冷藏;
保质期: 6个月-1年。
规格:10g/瓶
用途:生化培养基,赖氨酸脱羧酶试验(GB、SN标准)
成分(g/L):
酵母浸粉 3.0
L-赖氨酸 5.0
葡萄糖 1.0
溴甲酚紫 0.016
pH值6 .7 ± 0.1 25℃
除溴甲酚紫外,将各成分加入蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10min,加热至完全溶解,调至pH6.7±0.1。分装于10mm×100mm试管,每管1mL。121℃高压灭菌10min。灭菌后应立即取出放凉,接种培养后,培养基颜色变为深紫色的为阳性反应,变为黄色的,为阴性反应。
用法:称取本品 9.0g ,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装于试管(12mm*100mm),每管 1-1.5ml,121℃高压灭菌15 分钟,备用。
配置方法:
将蛋白胨、肉膏、葡萄糖、琼脂及吡哆醛溶化后,调整pH为6.0~6.3。再按量加入溴甲酚紫和甲酚红。在每100ml基础培养基内,分别按1%加入L-赖氨酸。另100ml基础培养基不加氨基酸作为对照。加入氨基酸后再调整pH至6.0~6.3,分装小试管,15磅15分钟灭菌,置高层。使用,表面覆盖层灭菌液体石蜡。
赖氨酸脱羧酶培养基用于细菌生化试验。其中蛋白胨、酵母粉提供氮源,葡萄糖提供碳源,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,L-赖氨酸作为反应底物。具有氨基酸脱羧酶的细菌,能分解氨基酸使其脱羧生成胺(赖氨酸→尸胺)和二氧化碳,使溶液为碱性,溴甲酚紫保持紫色。如果不脱羧,肠杆菌科的细菌能分解葡萄糖,产酸,溴甲酚紫变为黄色。
氨基酸脱羧的对照管为葡萄糖发酵管,不含氨基酸,由于实验结果阳性的为保持紫色不变,阴性结果为黄色,为保证结果的可靠性,须同时接种对照管,如对照管变为黄色,说明细菌接种成功,证实试验管紫色(不变色)为阳性,而非未接种好细菌。此外,由于氨基酸脱羧的产物为尸胺、腐胺等,遇氧不稳定,故各管接种完细菌后,需加入几滴液体石蜡隔绝空气,保持胺的稳定性。
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