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乙醇脱氢酶(ADH)提取试剂说明书
点击次数: 132发布时间:2011/3/7
资料简介: 产品名称:乙醇脱氢酶(ADH)提取试剂
产品规格:500ml
分类:细胞组分分离
储存条件:—20℃,避光,12个月
用途:主要用于裂解植物组织,提取样品中的乙醇脱氢酶
简介:
乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)的系统名为乙醇:辅酶I氧化还原酶(alcohol:NAD+ oxidoreductase),大量存在于人和动物肝脏、植物及微生物细胞之中,是种含锌金属酶,具有广泛的底物特异性。乙醇脱氢酶够以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为辅酶,催化伯醇和醛之间的可逆反应: CH3CH2OH+ NAD+→ CH3CHO +NADH+ H+。在人和哺乳动物体内,乙醇脱氢酶与乙醛脱氢酶(ALDH)构成了乙醇脱氢酶系,参乙醇脱氢酶与体内乙醇代谢,是人和动物体内重要的代谢酶。作为生物体内主要短链醇代谢的关键酶,它在很多生理过程中起着重要作用
自备材料:
1、蒸馏水
2、离心管或试管
3、匀浆器或研钵
4、低温离心机
操作步骤(仅供参考):
1、取植物组织清洗干净,切碎。
2、配制乙醇脱氢酶提取工作液:取出乙醇脱氢酶提取液和PMSF,恢复至室温,混匀,即配即用,不易久置,否则蛋白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。
3、加入预冷的乙醇脱氢酶提取工作液,冰浴情况下充分匀浆或研磨。
4、离心,留取上清液即为乙醇脱氢酶粗提液,保存,用于乙醇脱氢酶的检测或其他用途。
计算:组织或植物粗酶液获得率(ml)=上清液体积(ml)/组织或植物质量×100/%
注意事项:
1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20-80℃。
2、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。
3、所测样本的值高于标准曲线的上限,应用乙醇脱氢酶提取工作液稀释样品后重新测定。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴次性手套操作。
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