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肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)操作步骤
点击次数: 43发布时间:2011/3/7
资料简介: 中文名称:肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)
产品规格:2×100mL
用途:肥大细胞脱颗粒染色
注意事项:甲苯胺蓝法染色,肥大细胞颗粒呈蓝紫色,细胞核呈蓝色。
储存条件:室温,避光,12个月
产品简介:
1.肥大细胞(Mastcell)是疏松结缔组织内常见的细胞,常成群的沿着小血管和淋巴管分布,也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围,一般细胞较大,直径约为20-30μm,呈圆形或椭圆形,胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。
2.甲苯胺蓝(ToluidineBlueO)中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。肥大细胞颗粒呈紫红色,其他呈蓝色。
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)操作步骤:
1.取新鲜组织立即固定于10%中性福尔马林固定液中,常规脱水包埋;
2.切片厚度4-5μm,常规脱蜡至水;
3.系列乙醇,自来水洗;
4.入ToluidineBlueOStain,浸染1;
5.自来水稍洗;
6.TBO分化液分化,直至细胞核和颗粒清晰,可在显微镜下控制;
7.自来水稍洗,滤纸吸干或吹风机吹干水分;
8.95%乙醇,无水乙醇,每次;
9.二甲苯透明,中性树胶封固。
注意事项:
1.针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长;
2.应注意组织要新鲜,取出后立即固定;
3.甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水,否则容易导致褪色;
4.分色后应快速入95%乙醇,无水乙醇,二甲苯的时间不宜过久,否则容易导致褪色;
5.染色程度可通过改变染色时间或染色温度做适当调整;
6.每次试剂用完后,请迅速盖好,以免挥发;
7.石炭酸对皮肤、粘膜有强列刺激性和腐蚀性,使用时请穿实验服并戴一次性手套操作。
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