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黏液HID-AB染色液实验步骤
点击次数: 46发布时间:2011/3/7
资料简介: 中文名称:黏液HID-AB染色液 简介: 组成: 操作步骤(仅供参考): 染色结果:硫酸化酸性黏液物质(如硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)棕紫色至棕黑色羧基化蛋白酸性黏液物质(如蛋白多糖和透明质酸)蓝色细胞核红色。 注意事项:
产品规格:3×25ml3×50ml
储存条件:室温,避光,12个月
用途:又称高铁二胺-阿利新蓝染色液,可以染色酸性黏蛋白、蛋白多糖、透明质酸等物质,可以区分硫黏蛋白和蛋白多糖。
注意事项:主要由高铁二胺溶液,Alcian 染色液等组成。染色结果为:酸性黏蛋白(硫酸化酸性黏液物质)呈棕紫色至棕黑色羧基化酸性黏液物质(蛋白多糖、透明质酸)呈蓝色,细胞核呈红色。
黏液HID-AB染色原理在于高铁二胺盐中的二铵盐与硫酸化酸性黏液物质结合,形成复合物而被显色。在pH值大大低于2.5时,组织内的硫酸根电离,带有一个负电荷,与阿利新蓝中的阳离子形成盐键,使带有硫酸根的组织(如硫酸黏液物质)染色,硫酸化酸性黏液物质等形成棕紫色至棕黑色。在黏液HID-AB染色液主要用于鉴别硫酸化酸性黏液物质和唾液酸性粘液物质,小肠上皮产生氮乙酰化唾液酸性黏液物质,大肠上皮产生氧乙酰化唾液酸性黏液物质和硫酸化酸性黏液物质。该法可配合AB-PAS染色,对肠上皮化生的类型进行鉴定,对转移性肿瘤发生黏液的类型进行鉴定。
1、爱先蓝染液(pH2.5)
2、HID-A液:N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐
3、HID-B液:N,N-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐
4、三氯化铁溶液:三氯化铁
1、切片脱蜡至蒸馏水。
2、入配制好的HIDSolution浸泡12-24h(20~25℃)。
3、流水冲洗5min。
4、入Alcian染色液染色10-20min。
5、稍水洗。
6、入核固红染色液复染10min。
7、流水冲洗1min
8、梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。
1、固定液采用10%中性福尔马林。
2、HIDSolution不宜提配制。用后可存储于4℃,仍可用1~2次,但特异性不佳。
3、HIDSolution对人体有一定损害,请小心操作,避免接触人体皮肤。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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