人胸肾表达趋化因子(BRAKCXCL14)ELISA试剂盒说明书_资料下载

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人胸肾表达趋化因子(BRAKCXCL14)ELISA试剂盒说明书

点击次数： 5发布时间：2011/3/7

上传者：上海岑特生物科技有限公司
上传时间： 2024/1/29 14:13:04
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文件类型： docx
所属分类：应用方法
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资料简介：产品中文：人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒

产品英文：Human Breast ａnd kidney expressed chemokine,BRAK ELISA KIT

预期应用：ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体含量

试验原理：

酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。

试剂盒组成：

试剂盒组成48T96T保存

说明书1份1份　

封板膜2片（48）2片（96）　

密封袋1个1个　

酶标包被板1×481×962-8℃保存

标准品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存

标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存

酶标试剂3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存

样品稀释液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存

显色剂A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存

显色剂B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存

终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

操作步骤：

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为30ng/L，20ng/L ，10ng/L，5ng/L， 2.5ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

标本要求：

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

注意事项：

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本O D值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定计算时请后乘以总稀释倍数(xn)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:2-8℃

2.有效期:6个月

人胸肾表达趋化因子(BRAKCXCL14)ELISA试剂盒

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