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上海岑特生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒,质粒定制,各种动物血清,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,标准品对照品,培养基,抗体,细胞株,微生物,染色液溶液,实验耗材

当前位置:易推广>上海岑特生物科技有限公司>资料下载>人chemerin ELISA试剂盒操作步骤

资料下载

人chemerin ELISA试剂盒操作步骤

点击次数: 13发布时间:2011/3/7

  • 上 传 者: 上海岑特生物科技有限公司
  • 上传时间: 2024/7/25 10:23:40
  • 文件大小: 39KB
  • 文件类型: docx
  • 所属分类: 操作维修手册
  • 下载次数: 0次
  • 查看次数: 13

资料简介: Normal0false7.8 磅02falsefalsefalseEN-USZH-CNX-NONE

产品名称:人Chemerin(RARRES2)ELISA试剂盒
英文名称:Human Retinoic acid receptor responder protein 2 ELISA Kit
产品规格:96T

本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析人血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中Chemerin的含量。预先包被的抗体和检测相抗体都是Chemerin多克隆抗体。检测抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBSTBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBSTBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的Chemerin呈正相关。

Chemerin
也称TIG2RARRES2,分子量为18KDChemerin基因在体内可以表达出一种具有低活性的复合蛋白,即体prochemerin,经细胞外蛋白酶水解作用,prochemerin可以转变为具有高活性的chemerin蛋白。Chemerin主要表达在白色脂肪组织、肝、卵巢等组织中。

检测指标:Retinoic acid receptor responder protein 2RARRES2ChemerinTazarotene-induced gene 2 proteinTIG2
检测范围:780pg/ml50ng/ml
特异性:系统与其他细胞因子无交叉反应
敏感性:<5pg/ml

产品组成:

组分

规格

数量

预包被抗人Chemerin抗体的96孔板

96T

1

重组人Chemerin标准品(冻干)

50ng/

2

生物素标记抗人Chemerin(100X)

130μl

1

亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X)

130μl

1

样品稀释液

30ml

1

抗体稀释液

12ml

1

ABC稀释液

12ml

1

TMB显色液

10ml

1

TMB终止液

10ml

1

洗涤缓冲液(25X)

20ml

1

封板膜

 

4



储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)。
有效期:6个月(4℃)12个月(-20℃)。

参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)

浓度(ng/ml)

0

0.78

1.56

3.12

6.25

12.5

25

50

OD

0.008

0.349

0.577

0.854

1.079

1.315

1.459

1.639

操作步骤
1.
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。
2.
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4.
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次,拍干。
6.
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 
7.
温育:操作同3
8.
洗涤:操作同5
9.
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.
测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


计算

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

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