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原代细胞、细胞株与细胞系的解释与选择
点击次数:321发布时间:2023/6/7
从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。
原代细胞生长缓慢,一般认为,原代细胞培养的第1代和传代到第10代以内统称为原代培养。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。
原代细胞是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain)是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line)是原代细胞经传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
原代细胞与细胞系该如何选?
原代细胞生长缓慢,一般认为,原代细胞培养的第1代和传代到第10代以内统称为原代培养。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能够传到40-50代,这种传代细胞叫做细胞株。当细胞传至50代以后又会出现“危机”,这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点,从而可能无限制地传代下去,这种传代细胞称为细胞系。
细胞系因其容易培养、种类多、产量可观的优点一直是细胞水平研究的Shou选,且价格相对低廉,但细胞系“价廉却不一定物美”。研究发现,细胞系在连续培养的过程会不断发生突变,长时间的多次传代可能会导致细胞系的基因型和表型都发生变化,从而影响实验结果。例如有研究报道,HEK293经腺病毒转染后得到的细胞更接近未成熟神经元细胞;MDA-435作为乳腺癌细胞被广泛用于各种研究,但近年来越来越多证据表明其可能为一种黑色素瘤细胞。
原代细胞则不存在这些问题,虽然原代细胞分离和培养的成本可能相对更高,但原代细胞作为更接近体内环境的研究模型,可让你的研究结论更加接近“事实”,且原代细胞的使用可减少动物实验所需的成本开支。另外在某些人体体内无法进行的实验,原代细胞因其高度保持了在体内的生物学特性,可在一定程度解决这个问题。
由于永生化的细胞系与体内组织细胞的生物特性相差甚远,导致许多生理和病理的过程难以重复,近年来,原代细胞正逐步成为细胞和分子生物学研究的Shou选工具,为疾病机制、药物研发等提供了高质量的模型。但不可能否认的是,细胞系在科研中的地位仍十分重要,例如在标准化方案的确立上细胞系是良好的工具,某些需要大量细胞的研究如全基因组遗传筛选,由于原代细胞数量有限且对培养条件要求苛刻,细胞系也是第1选择。