当前位置： 易推广 > 生物试剂/抗体/细胞 > 试剂盒 > 其他试剂盒 > 上海岑特生物科技有限公司 > 产品展示 > PCR检测试剂盒 > 猪急性腹泻综合征冠状病毒荧光RT-PCR检测试剂盒
猪急性腹泻综合征冠状病毒荧光RT-PCR检测试剂盒
价格：￥电议
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2024/11/18 15:16:02更新时间：2024/11/18 15:16:02
产品完善度： 访问次数：89
企业档案
会员类型：会员
已获得易推广信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
易推广会员：8年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号：91310120MA1HL6**** 【已认证】
法人代表： 侯亚*** 【已认证】
企业类型：经销商 【已认证】
注册资金：人民币**万 【已认证】
产品数：20155
参观次数：6253224
手机网站：http://m.yituig.com/c128110/
旗舰版地址：http://guduo.app17.com
详细内容
产品名称：猪急性腹泻综合征冠状病毒荧光RT-PCR检测试剂盒
规 格：50T/盒
反应体积：25μL
试剂类型：液体
【预期用途】
本试剂盒适用于检测猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)的RNA，用于猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。本产品不提供活体样品做阳性对照，仅提供人工合成的特异性DNA///片段标准品作为阳性对照，仅限于业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗用途。
【储存、有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于7次，有效期12个月。
【技术原理】
采用TaqMan一步法荧光定量RT-PCR技术，结合特异性扩增引物对目的基因进行体外扩增，本试剂盒具有灵敏性高、特异性强、反应时间短等优点，操作简便，污染概率低等特点。
【使用方法】
一、试剂准备（在试剂准备区进行）
1. 取出包装盒中的各组分，室温放置，待其完全融化，混匀后备用。
2. 根据待测样本、阴性对照、阳性对照的数量，按下表1单反应体系配制方法，取相应量的试剂，充分混匀成PCR-Mix，按照20 μL/反应分装到PCR反应管中，瞬时离心后备用。
表1：单反应体系配制方法
| 试剂 | 反应液 | 混合酶 |
| 用量 | 19 μL | 1 μL |
二、样本准备（在样本准备区进行）
1. 使用商品化的病毒核酸提取试剂盒，参照说明书进行操作，提取好的核酸样本如不能立即检测，建议-70℃以下保存。
2. 取出样本后混匀，将阴性对照、待测样本、阳性对照各5 μL加入到PCR反应管中混匀。
3. 盖上管盖，2000 rpm离心30。
4. 将PCR反应管转移到扩增区进行上机。
三、PCR（在核酸扩增区进行）
1. 将上述PCR反应管按照实验布局依次放入PCR仪对应检测孔内，并记录顺序。
2. 按表2设置PCR扩增循环参数。
表2：PCR扩增相关参数
| 体系 | 反应体系设为25 μL | ||
| 信号采集 | 选择FAM通道检测H5亚型； 选择CY5通道检测H7亚型； 选择ROX通道检测H9亚型。 | ||
| PCR 反应 条件 | 阶段 | 条件 | 循环数 |
| 逆转录 | 50℃：30 min | 1 | |
| 预变性 | 95℃：5 min | 1 | |
| PCR | 95℃：15 sec | 45 | |
| 60℃：30 sec （此阶段结束时采集荧光信号） | |||
【结果分析】
表3：结果分析表
| 实验成立 条件 | 阴性对照 | 三通道Ct＞38或者No Ct，线形为直线或轻微斜线，无指数增长期。 |
| 阳性对照 | 三通道Ct≤30且出现典型的S型扩增曲线。 | |
| 样本结果 判定标准 | H5亚型 阳性 | FAM通道Ct≤35且出现典型的S型扩增曲线。 |
| H7亚型 阳性 | CY5通道Ct≤35且出现典型的S型扩增曲线。 | |
| H9亚型 阳性 | ROX通道Ct≤35且出现典型的S型扩增曲线。 |
| 结果可疑 | 任一通道35＜Ct≤38，建议复测，复测结果仍为可疑，且出现明显指数增长，判为阳性。否则为阴性。 |
| 结果阴性 | Ct＞38或者No Ct，线形为直线或轻微斜线，无指数增长期。 |
【注意事项】
1. 使用本试剂盒的实验室，应严格按照国家有关基因扩增检验实验室管理规范进行管理。
2. 各区域物品均为用，不得交叉使用，以免污染。检测结束后，应立即对工作台进行清洁消毒。
3. 吸取反应液时，应尽量避免产生气泡。上机，应注意检查各反应管是否盖紧，以免液体蒸发造成结果不准确。
4. 检测过程中使用过的吸头，应直接打到盛有10%次氯酸的废液缸内，检测结束的PCR反应管，切忌开盖，并与其他废弃物品一同灭菌后丢弃。
5. 工作台及各种实验用品应定期用10%次氯酸、75%酒精或紫外灯进行消毒。
6. 试剂使用应在常温下充分融化并混匀。不同批号的试剂请勿混用，并在有效期内使用。
【储存条件与有效期】
试剂盒应置于-20℃冷冻避光贮存；
试剂盒保存有效期为12个月；
试剂盒反复冻融次数不宜超过5次。
