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绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒操作方法
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上海岑特生物详细为您介绍绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒操作方法,使用步骤,注意事项,操作说明书,价格,规格,型号,用途,特等资讯,本司是家专业经营科研试剂的优质供应商,专业代理销售进口/国产elisa试剂盒,动物血清,培养基,抗体,实验耗材,标准品对照品,染色液,蛋白质,细胞株,微生物,抗生素,其他生化试剂,化学试剂等,提供elisa试剂盒代测服务,所供应的ELISA试剂盒种属涵盖大鼠,小鼠,人,植物,羊,兔,鸡,猪,狗,牛,马,鱼,鸭,猴及其他动物,更多种属请来电联系我司销售人员!
中文名:绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒
别名:绵羊白介素1(IL-1)ELISA Kit
供应商:上海岑特
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
适用范围:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断。
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
产品用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
样本类型:适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。
绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒安全性:
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
4. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
5. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
8. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
9. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
10. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
11. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
12. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒组织结构:
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒操作方法成分:
1、包被抗-HBs反应条 1瓶
2、酶结合物 1瓶
3、HBsAg阳性对照 1瓶
4、HBsAg阴性对照 1瓶
5、洗涤液:用前每瓶作1:20稀释 1瓶
6、显色剂(TMB)A 1瓶
7、显色剂(TMB)B 1瓶
8、终止液 1瓶
ELISA试剂盒的储存及有效期:
1. 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
2. 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。
注意:
试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒操作步骤:
1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内压 实自封条,密封口袋,放回4℃。
2.空白孔加标准品和标本稀释液,其余相应孔中加标本或不同浓度标准品(100ul/孔),用封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱孵育90分钟。
3.提前20分钟准备生物素化抗体工作液。
4.洗板5次。
5.空白孔加生物素化抗体稀释液,其余孔加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱孵育60分钟。
6.提前20分钟准备酶结合物工作液。避光室温(22-25 ) ℃ 放置。
7.洗板5次。
8.空白孔加酶结合物稀释液,其余孔加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱,避光孵育30分钟。
9.打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
10.洗板5次
11.加入显色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分钟。
12.加入终止液100ul/孔, 混匀后即刻测量OD450值(3分钟内)。在仪器保存读数结果并打印一份纸质结果。
13.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回电冰箱保存至有效期结束。 建议保存酶标板框,以备下次或者今后试验使用。
绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒操作方法:
1、加入待测标本每孔0.05ml,并设HBsAg阳性对照2孔,HBsAg阴性对照2孔,空白对照1孔,然后加入酶结合物每孔1滴(0.05ml、空白对照孔不加),充分混匀后置37℃孵育30分钟。
2、洗板:弃去反应条孔内液体、拍干、用洗涤液注满每孔,弃去拍干,反复五次后拍干。
3、显色剂:先加显色剂A每孔1滴(0.05ml),然后再加显色剂B每孔1滴(0.05ml),混匀,37℃孵育10分钟。
4、每孔加终止液1滴(0.05ml),混匀。
结果:
比色法:波长450nm,先用空白孔校零点,然后读取各孔光密度值。
样品OD值/阴性对照平均OD值≥ 2.1判断为阳性,否则为阴性。
备注:阴性对照平均OD值低于0.05作0.05计算,高于0.05按实际OD值计算。阳性对照OD值≥0.8,实验结果有效。
注意事项:
1、试剂盒置2℃~8℃保存。
2、使用前试剂应摇匀,并弃去1~2滴后垂直滴加。
3、从冷藏环境中取出试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔条,置室温平衡30分钟后再行测试,余者应及时封存于冰箱中以备后用。