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    中文名称： DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B

    英文名称：DEAE-SepharoseCL-6B

    包装：25毫升/100毫升

    级别：BR

    产品用途：生化研究。适用于各种带阳性电荷生物大分子的浓缩纯化等

    储存方式：2～8℃

    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B价格 相关介绍：

    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B是一种将三甲胺基烷基季铵基键合在琼脂糖凝胶微球上形成的带有强碱阴离子基团的层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构，与生物活性大分子有很好的相容性，具有离子交换容量高、非特异性吸附少、流速快等特点，广泛用于蛋白质、核酸、多肽及多糖等生物大分子的实验室规模制备和生物制药、生物工程的工业化制备。

    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B层析原理：

    凝胶过滤－－－－－－－－依赖于分子的大小和形状

    吸附层析－－－－-依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键数量和质量

    分配层析－－－－－－－－－－－－－－－－依赖于被分离化合物在流动相（溶剂）和固定相（凝胶）之间的分配，这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。

    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B使用方法：

    （1） 饱和层析柱：

    用洗脱剂将凝胶摇匀，直立柱身，让其自然沉降，此时要防止气泡留在其中。至少半小时打开开关，流出几个柱体种的洗脱剂，目的是使其膨胀在正确比例的洗脱剂中。

    （2） 样品处理：用尽量少的洗脱剂溶解样品，常压过滤。

    （3） 湿法上柱。这也是要有技巧的步骤。

    （4） 洗脱：控制流速，一般1drop/s以下，可参见厂家的一些参数；必要时更改极性（很多时一个极性就可以将样品洗脱完毕），再生以备下次使用。

    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B 分离的技巧以及使用心得：

    （1） 流速不可太快，切切不可新急，所谓欲速则不达。

    （2）柱子尽可能长， Sephadex LH20 柱长的增加将极大地改善分离，所不要吝惜填料，宁可将填料全装在一根大柱子中，不要将填料装成几根小柱。所谓集中优势兵力，打击敌人。

    （3） 馏分一定要接的细，可1/10，或1/20 个保留体积接成一馏分。

    （4） 洗脱体积一般为2-3个保留体积，对特殊保留强的化合物，可洗脱5个保留体积。

    （5）鞣质成分死吸附严重，如不在乎填料者，可用Sephadex LH20 分鞣质

    （6）Sephadex LH20 对黄酮类成分的分离效果极佳，方法很成型，有大量文献参考。

    （7）填料反复使用，每次用完，一般可用甲醇将柱子洗干净，然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来，待用。

    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B价格 使用时的注意事项：

    1.装柱

    装填的重要原则就是需要形成一个稳定均一的柱床。胶颗粒越均一（粒径分布越窄），越容易获得稳定均一的柱床。但是对于Sephadex LH-20而言，25~100μm的粒径范围相对于许多用于制备色谱的填料而言，不能说分布均一，也就是说其粒径分布较宽。然而当胶溶胀后就相对容易得到均一的柱床。这对于长柱（至250cm）而言也是同样的。在装柱前，层析柱和储槽都必须进行彻底的清洗。

    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B在使用之前必须进行溶胀。在溶胀的过程中，要尽量避免过分搅拌，否则会破坏球形胶粒，且要避免使用磁力搅拌器。

    在室温下，将凝胶溶胀于层析溶剂中至少三小时，溶胀后胶体积的大小决定于所使用的溶剂系统，请参考后页之干胶溶胀表计算特定柱体积所需要干胶的量。使溶胀胶体积沉淀之后占总体积的75%，上层溶剂占25%，这时，悬浮液从一个容器倒入另一容器时胶粒可移动。将溶胀后的凝胶根据装柱要求均匀倒入柱内，在保证胶粒不变形的前提下，应在尽可能高的压力下装柱，反压不要超过1.5ba。

    2.平衡

    上样前，用洗脱液平衡层析柱至少两个柱体积直到基线变得平稳为止，如改变溶剂应该注意凝胶在新溶剂中的溶胀性质，并根据性质确定柱高调节器的位置，如使用相同的溶剂，在以后的层析中柱平衡可以省略。

    3.洗脱液

    为确保延长层析柱的使用寿命，所有的缓冲液都应该离心或经过0.45um的膜过滤以除去杂质。

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