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鸡禽流感 H9抗体检测试剂盒注意事项
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详细内容
名称:鸡禽流感 H9抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Diagnostic Kit for Chicken Antibodies to Avian Influenza Virus (ELISA)
供应商:岑特生物
产地:国产|进口
检测样本:血清
检测方法:酶联免疫法
产品规格:96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保质期:12个月
储藏:4~30℃密封干燥保存,忌冷冻,避免阳光直射。
本试剂用于检测禽类血清中禽流感病毒抗体,可用于免疫效果评价、辅助诊断等。
鸡禽流感 H9抗体检测试剂盒注意事项【试验原理】
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
序号 | 名称 | 规格(96T×1) | 规格(96T×2) |
1. | 酶标板 | 96T×1 | 96T×2 |
2. | 酶标记物 (红盖) | 11ml×1 | 11ml×2 |
3. | 样品稀释液 (黄盖) | 50ml×1 | 50ml×1 |
4. | 20X浓缩洗涤液 | 40ml×1 | 40ml×1 |
5. | 底物液A (白盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
6. | 底物液B (黑盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
7. | 终止液 (黄盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
8. | 阳性对照 (红盖) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
9. | 阴性对照 (绿盖) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
10. | 盖板膜 | 1张 | 2张 |
11. | 自封袋 | 1个 | 1个 |
12. | 说明书 | 1份 | 1份 |
【储存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期为12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如2μl血清加入198μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照≤0.20,阳性对照≥0.6。
【检验结果的解释】
1.C.O(临界值)=0.13+阴性对照孔均值(阴性对照孔均值低于0.07时以0.07计算);
2.未曾免疫鸡群:样品A值≥C.O为阳性;样品A值<C.O为阴性。
3.免疫鸡群:监测并记录样本当时的抗体水平,根据结果分析抗体水平的分布及鸡群免疫状态的动向。
【试验方法的局限性】该试验仅作为定性检测鸡血清或血浆中禽流感病毒IgG抗体,根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
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