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环丙沙星快速检测试剂盒技术原理
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详细内容
名称:环丙沙星快速检测试剂盒
供应商:岑特生物
产地:国产|进口
检测样本:组织、水产、蜂蜜、禽蛋
检测方法: 酶联免疫法
检测限: 0.1ppb/0.05ppb
产品规格:96T×1/盒
保质期:12个月
储藏:于2~8℃避光保存。
环丙沙星快速检测试剂盒技术原理 详细介绍:
一、产品概要
环丙沙星是一种喹诺酮类抗菌药,因其具有广谱抗菌活性和很强的组织穿透能力,因而成为畜禽和水产的专用喹诺酮类抗菌药物,被大量用于治疗、预防和促进生长。但由于其耐药性和潜在的致癌性,欧盟、日本及我国均制定了在组织中的残留限量。
环丙沙星检测试剂盒采用ELISA检测方法,快速便捷即能检测出样本环丙沙星的药残留量,其方法能限度减少操作失误和工作的强度。
二、试剂盒原理
环丙沙星检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测蜂蜜、动物组织(鸡肉、猪肉、鱼、虾)、牛奶、奶粉和鸡蛋等样本中的环丙沙星(Ciprofloxacin,CPFX),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的环丙沙星和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗环丙沙星抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含环丙沙星含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中环丙沙星的残留量。
三、适用范围:环丙沙星检测试剂盒可定性、定量检测动物组织(鸡肉、猪肉、鱼、虾)蜂蜜样本中环丙沙星的残留量。
四、 技术指标
2.1 试剂盒灵敏度:0.1ppb(ng/ml)
2.2 反应模式:25℃,45min~15min。
2.3 检测下限:
组织:0.3ppb 蜂蜜:0.4ppb 牛奶:3ppb 奶粉:6ppb 鸡蛋:3ppb
2.4 交叉反应率:
环丙沙星: 左氧氟沙星:10% 诺氟沙星:3% 沙拉沙星:2%
其它沙星类药物交叉反应率均小于0.1%
2.5 样本回收率:
组织:85%±15% 蜂蜜:85%±15% 牛奶:85%±15% 奶粉:85%±15% 鸡蛋:85%±15%
五、试剂盒组成:酶标板、标准液(6个)、高标准液、酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩洗涤液、复溶液
六、贮藏条件及保存期
储藏条件:试剂盒于2-8℃保存,不要冷冻。
保 质 期:该产品有效期为1年,生产日期见包装盒。
操作步骤
一、样本前处理
产品适用于动物组织、蜂蜜、牛奶、奶粉、鸡蛋等样本检测,具体处理方法参见相应说明书。
二、 酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上。
1 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2 加样反应:加标准品或样本50?l/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50?l/孔,再加入50?l/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应45分钟。
3 洗 涤:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用工作洗涤液250?l/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。
4 显 色:每孔加入底物液A 50?l,再加底物液B 50?l,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟。
5 终 止:每孔加入终止液50?l,轻轻振荡混匀,终止反应。
6 测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应终止反应后在10分钟内完成。
1 百分吸光率的计算
标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值(双孔)除以个标准(0ppb)的吸光度值,再乘以,即百分吸光度值(%)= A ×A0
A—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb标准溶液的平均吸光度值
2 标准曲线的绘制与计算
以标准品百分吸光率为纵坐标,对应的标准品浓度(ppb)的对数为横坐标,绘制标准品的半对数曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中待测物的实际浓度。
若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析。
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