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人血清白蛋白单克隆抗体
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详细内容
英文名称:Anti-Serum albumin (3F4)
规格:0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
浓度:1mg/1ml
浓 度 1mg/1ml
产品规格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Mouse
克隆类型 monoclonal
克隆号 3F4
交叉反应 Human
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 69kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免疫原 human Serum albumin
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储存液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
工作原理 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
保存条件 Store at -20 °C for one year.
抗体作用:
1、提供基本营养物质;
2、提供激素和各种生长因子;
3、提供结合蛋白;
4、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤;
5、对培养中的细胞起到某些保护作用
产品功能:
本产品以血清1:40左右为抗原,双相扩散1:16~32。
抗IgG对r链特异,抗IgM对u链特异,抗IgA对α链特异。
注意事项:有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或4℃冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。
血清解冻:将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于2~8℃区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如37℃),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
操作流程:
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。
同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
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