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叶绿素测定仪工作流程以及特别提示
工作流程
计算
二个LED光源发射二种光，一种是红光(峰波长650nm)，一种是红外线(940nm)，二种光穿透叶片，打到接收器上，光信号转换成模拟信号，模拟信号被放大器放大，由模拟/数字转换器转换成数字信号，数字信号被微处理器利用，计算出SPAD值并显示在显示器上，也自动储存到内存中。
SPAD502叶绿素仪测量值的校准通过下面程序完成。
(1)在校准过程中，测量头不夹样品，二个LED次序发光，被接收的光转换成电信号，光强度的比率被用来计算。
(2)在测量头夹住样品后，二个LED再次发光，通过叶片传输的光打到接收器上，被转换成电信号，传输光的强度比率被计算。
(3)步骤1和2的值用于计算SPAD测量值，即表示夹住的样品叶片当前叶绿素相对含量。
实验结果计算:将测定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.95A665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度(Ca、Cb:mg/L)，二者之和为总叶绿素的浓度。*后根据下式可进一步求出植物组织中叶绿素的含量:
叶绿素的含量(mg/g)= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重(或干重)。
测量前准备
1、电池安装:拧开SPAD502下部的电池盒盖，正极向里安装2节AA电池;再拧上盖。可以使用碱性电池和碳锌电池，不能使用性质不同或电量不同的电池。
2、使用读数校验卡
(1) 打开开关，同时按"1 DATA DELETE"键和"DATA RECALL"键，仪器进入检查模式，屏幕立刻出现"CH"，然后转到"CAL"状态。
(2) 校准，直到出现 图示，说明校准完成。
(3) 移动深度滑块
(4) 插入读数校验卡，按下指压台，直到听到一声"哔"声，测量值显示在屏幕上。
(5) 重复测量读数校验卡几次。
(6) 按"AVERAGE"键，求测量的平均值，屏幕上显示的平均值应在读数校验卡上的范围之内，如果不在范围内，请清洁发射窗和接收窗，从步骤1开始重复测量，如仍不在范围内，机器可能需要修理。
(7) 将电源关闭，然后重新开机，正常测量。
特别提示
l 读数校验卡只能在检查模式下使用。
l 只有随机的读数校验卡(与机器有机同序列号)能提供精确值。
l 读数校验卡不能在户外使用，不能在阳光直射、高温、高湿的环境中使用。
l 测量值与读数校验卡上的值不同时，不能通过输入补偿值修正。
l 不要碰读数校验卡的玻璃表面，如果脏了，可用湿的、软布处理。
l 要将读数校验卡放在附件包里保护，并且不能放在高温、高湿环境中
维护
(1) SPAD502是防水的，在下雨天可以照常使用，用后请用干软布擦净，但机器绝对不能浸泡在水中或用水洗。
(2) 仪器不要剧烈振动。不要强压显示屏和测量头
(3) 不要将仪器放在阳光下或热源附近。
(4) 用后要关机。
(5) 仪器脏了，要尽量用干布擦净，不能用酒精或化学药品接触仪器表面。
(6) 不要拆卸仪器。
(7) 保存温度在-20~55℃，不要放在高温高湿条件下，应与一些干燥剂放在一起。
(8) 如果保存期在二周以上，应将电池取出。
工作原理
测量值是通过对在二个不同波长区域，叶片传输光的数量进行计算，在这二个区域叶绿素对光吸收不相同的。这二个区域是红光区(对光有较高的吸收且不受胡萝卜素影响)和红外线区(对光的吸收极低)。
Spad值是指叶绿素的相对含量，通过spad值可以了解植物硝基需求量，还可以推算出氮肥的含量。
因为spad值跟植物叶绿素含量是相关的，所以只要测量植物中叶绿素的含量，就能知道spad值，
叶绿素是吸收光线的主要物质，不同波长的光线，叶片的吸收量不同，于是通过两种波长范围内的透光系数来确定叶片当前叶绿素的相对数量。SPAD-502叶绿素仪就是通过测量叶子对两个波长段里的吸收率，来评估当前叶子中的叶绿素的相对含量。
测量
SPAD502叶绿素仪的测量面积只有2mm*3mm(厚度不超过1.2mm)。中心线指示所测面积的中心。
1、校准。每次开机都需校准，请遵照以下程序进行
(1) 打开电源
(2) 不放样品，按下探测头，直到听到"哔"一声，屏幕显示N=0 ―――表明校准完成。
(3) 如果持续蜂鸣，出现图示 ，表示校准未正确完成，按(2)重复进行校准。如果出现图示 ，则发射窗或接收窗需要清洁，清洁后按(2)重新校准。
2、将叶片放入测量头部
(1) 确定样品完全覆盖接收窗。
(2) 不要测定过厚的样品，例如叶脉，如果测定有较多叶脉的样品，请多次测量并求平均值。
(3) 如果发射窗或接收窗脏了，测量不准确，要先清洁。
(4) 避免日光直射仪器，以免影响测量。
(5) 关闭测量头，按指压台直到听到一"哔"声，测量结果会显示在屏幕上，并自动储存。
(6) 如果听到连续的蜂鸣，说明测量头闭合不严，或者样品太厚或太薄，重复2、3步测量，直到测定结束。
(7) 如果显示的结果小数点闪烁(或者没有小数点)，说明测量结果大于50(100)，结果的精确性不能保证。
3、数据储存
(1) SPAD502在测定完后自动储存，存储空间为30个数据，当存储满了后，个数据将被删除，新的数据存储在第30位置，即删除了第1个，那么原来的2~30变为1~29。当机器关闭后，所有的数据都被删除。
(2) 平均:所有存储的数据进行平均计算。
(3) 清空:所有的数据被删除。
(4) 删除当前数据:删除当前显示的数据
(5) 浏览数据:显示以前数据。
4、输入补偿值
补偿值是用户根据自己的需要输入，进行数据修订的，这种修订是以几台仪器的标准化为依据的。补偿值可以设-9.9~9.9。补偿值输入后，数据按照如下公式计算:显示值=测量值+补偿值
(1) 进入补偿值模式:打开电源 同时按"AVERAGE"和"DATA RECALL"，LCD显示以前输入的补偿值。
(2) 设置补偿值:通过按"ALL DATA CLEAR"键和"1 DATA DELETE"键设置补偿值，每按"ALL DATA CLEAR"键一次，补偿值增加0.1，每按"1 DATA DELETE"键一次，补偿值减少0.1。补偿值范围可设在-9.9~9.9。读数校验卡不能用来确定补偿值。
(3) 补偿值保存:按"AVERAGE"键，显示的补偿值将被保存，完成输入。关机，然后再开机，补偿值被起用，可以开始测量。北京富瑞恒创科技有限公司。
原创作者：北京富瑞恒创科技有限公司
