您好,欢迎来到易推广 请登录 免费注册

上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

当前位置:易推广>上海谷研实业有限公司>技术文章>细胞铺板实验经验分享

企业档案

会员类型:会员

已获得易推广信誉   等级评定
41成长值

(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问

(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈

(91+  )优质信誉积累,可持续信赖

易推广会员:8

工商认证 【已认证】

最后认证时间:

注册号: 【已认证】

法人代表: 【已认证】

企业类型:经销商 【已认证】

注册资金:人民币万 【已认证】

产品数:22394

参观次数:4117916

手机网站:http://m.yituig.com/c130377/

旗舰版地址:http://www.elisaguyan.com

技术文章

细胞铺板实验经验分享

点击次数:8541 发布时间:2018/7/24 9:55:56

       做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们*常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。

       尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。

      96孔板一般以100 微升每孔接种,直接用100 微升移液器吸取细胞悬液,沿孔壁(稍离开一点孔底即可,不要离底太高)直接接入,移液器不需完全打到,轻轻按下即可,每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(我一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。

     6孔板、12孔板或24孔板,可采用将每个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔依此类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板好掌握,效果没有96孔板好。

      培养瓶里面加好细胞以后(比如传代好/分好细胞以后),先顺时针摇晃3次,马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。

 phospho-c-Abl(Thr735) 己糖激酶2抗体
 phospho-c-Abl(Tyr204) 己糖激酶1抗体
 phospho-c-Abl(Tyr245) 急性髓细胞白血病1蛋白抗体
 phospho-c-Abl(Tyr412) 激肽释放酶9抗体
 phospho-c-Abl(Tyr89) 激肽释放酶7抗体
 phospho-CaMK2 alpha (Thr286) 激肽释放酶4抗体
 phospho-CaMK2 alpha (Thr305) 激肽释放酶3/舒血管素3抗体
 phospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 激肽释放酶1抗体
 phospho-CAMK2G (Ter286) 激肽释放酶14抗体
 

原创作者:上海谷研实业有限公司

相关产品

在线咨询

提交