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技术文章
猪TGFβ1elisa检测试剂盒反应步骤
点击次数：6405 发布时间：2020/6/30 15:19:51
猪TGFβ1elisa检测试剂盒反应步骤:
（1）严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。
（2）加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。
（3）封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板"的出现。
（4）用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，elisa试剂盒这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。
（5）合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。
（6）加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
（7）显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
（8）加样时保持显色剂不外流；A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
（9）应保证酶标板清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。ELISA试剂盒豚鼠从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。
试剂配制:
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
原创作者：上海谷研实业有限公司
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