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普氏立克次体(RP)检测试剂盒(荧光-PCR法)规格

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/2/22 20:50:49更新时间:2024/8/21 0:02:09

产品摘要:普氏立克次体(RP)检测试剂盒(荧光-PCR法)规格的热销产品:岩藻糖变旋酶抗体Anti-Layilin/FITC 荧光素标记透明质酸受体抗体IgGX三体综合征相关蛋白FUNDC1抗体Anti-LCAT/FITC 荧光素标记卵磷胆固酰基转移酶抗体IgG

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详细内容

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
货号
规格
普氏立克次体(RP)检测试剂盒(荧光-PCR法)规格
GOY-01P64445
50T
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确,重现性好的定量方法,已得到全的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
杨盘二孢菌*RhoA抗体Anti-DYRK1A Antibody原钙黏素8(PCDH8)ELISA试剂盒
葡汁有孢汉逊酵母Rho相关蛋白激酶2抗体Anti-DVL3 Antibody原钙黏素7(PCDH7)ELISA试剂盒
河生莱略特氏菌信号转导和转录激活因子4抗体Anti-E2F1 Antibody原钙黏素24(PCDH24)ELISA试剂盒
弯曲假单胞菌活性氧簇ROS抗体Anti-E2F2 Antibody原钙黏素22(PCDH22)ELISA试剂盒
拟可可毛球二孢磷酸化迁移诱导因子5抗体Anti-E2F3 Antibody原钙黏素21(PCDH21)ELISA试剂盒
皮状假丝酵母磷酸化核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体Anti-E2F2 Antibody原钙黏素20(PCDH20)ELISA试剂盒
空肠弯曲杆菌磷酸化Ras相关GTP结合蛋白抗体Anti-E2F3 Antibody原钙黏素19(PCDH19)ELISA试剂盒
冷解糖芽孢杆菌转录因子RelB蛋白抗体Anti-E2F4 Antibody(PB1113)原钙黏素18(PCDH18)ELISA试剂盒
异常汉逊酵母复制因子A蛋白2Anti-E2F4 Antibody原钙黏素17(PCDH17)ELISA试剂盒
链霉菌磷酸化复制因子A蛋白2抗体Anti-EAAT3/SLC1A1 Antibody原钙黏素15(PCDH15)ELISA试剂盒
鸡传染性法氏囊病阳性血清Ras相关GTP结合蛋白抗体Anti-E2F6 Antibody原钙黏素12(PCDH12)ELISA试剂盒
蕈状芽孢杆菌磷酸化ras基因相关蛋白Rab24抗体Anti-E2F5 Antibody原钙黏素11(PCDH11)ELISA试剂盒
塔宾曲霉磷酸化ras基因相关蛋白Rab24抗体Anti-EAPP Antibody原钙黏素10(PCDH10)ELISA试剂盒
土生类诺卡氏菌磷酸化G蛋白信号转导调节因子19抗体Anti-ECI1 Antibody原卟啉原氧化酶(PPOX)ELISA试剂盒
酿酒酵母磷酸化G蛋白信号转导调节因子19抗体Anti-EBAG9 Antibody原卟啉(EPP)ELISA试剂盒
焦曲霉磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体Anti-ECE1 Antibody鱼精蛋白3(PRM3)ELISA试剂盒
苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格:>98%,标准品
芽孢杆菌Bacillus│sp. 质量规格:>98%
: 长传2514资源名称: 福氏志贺氏菌 质量规格:0.98
普氏立克次体(RP)检测试剂盒(荧光-PCR法)规格结晶紫中性红胆盐葡糖琼脂
 VRBGA
其他 Violet Red Bile Glucose Agar;VRBG Agar
产品规格: BR
包装:250克
别:BR
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 

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