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乙型肝炎病毒cccDNA(HBV-cccDNA)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书
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品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2022/2/22 20:54:33更新时间：2024/8/21 0:02:09
产品摘要：乙型肝炎病毒cccDNA(HBV-cccDNA)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书的热销产品：衔接蛋白γ/γ1-Adaptin抗体Anti-LPL/FITC 荧光素标记脂蛋白脂酶抗体IgG半乳糖瓦尔登转化酶抗体Anti-LPLUNC1/FITC 荧光素
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详细内容
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| 乙型肝炎病毒cccDNA(HBV-cccDNA)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书 | GOY-01P64459 | 50T |
储存条件：
产品仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确，重现性好的定量方法，已得到全的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
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枯草芽孢杆菌磷酸化转录生长因子SP1抗体Anti-FGFR1 Antibody血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)ELISA试剂盒
Pseudomonas oryzihabitans分选连接蛋白4抗体Anti-FGF8 Antibody血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)ELISA试剂盒
菜豆间座壳分选连接蛋白9抗体Anti-FGF9 Antibody血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)ELISA试剂盒
克鲁斯假丝酵母分选连接蛋白10抗体Anti-FGFR2 Antibody血管内皮生长因子D(VEGFD)ELISA试剂盒
灰色链霉菌锈色变种分选连接蛋白11抗体Anti-FGFR1 Antibody血管内皮生长因子C(VEGFC)ELISA试剂盒
地衣芽孢杆菌分选连接蛋白6抗体Anti-FGFR2 Antibody血管内皮生长因子B(VEGFB)ELISA试剂盒
威特弗拉里亚鞘氨盒菌生成相关蛋白3抗体Anti-FGR Antibody血管内皮生长因子A(VEGFA)ELISA试剂盒
马德里毛壳磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Anti-FGG Antibody血管内皮生长因子165(VEGF165)ELISA试剂盒
花生根瘤菌SRC有丝分裂相关蛋白68抗体Anti-FGFR4 Antibody血管内皮生长因子145(VEGF145)ELISA试剂盒
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戈登氏菌（加词待译）钠离子通道相关蛋白1抗体Anti-FHIT Antibody血管紧张素Ⅲ(AngⅢ)ELISA试剂盒
食石油类诺卡氏菌SH3结构域激酶结合蛋白1抗体Anti-FHL1 Antibody血管紧张素Ⅱ受体2(AGTR2)ELISA试剂盒
桃中田壳小圆孢菌Src家族相关磷酸化蛋白2抗体Anti-FHL1 Antibody血管紧张素Ⅱ受体1(AGTR1)ELISA试剂盒
酿酒酵母SLAP2抗体Anti-FHL3 Antibody血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)ELISA试剂盒
布氏假单胞菌淋巴胞浆蛋白2抗体Anti-Fibronectin(FN1) Antibody血管紧张素1-9(Ang1-9)ELISA试剂盒
钙周期素结合蛋白抗体解酯假丝酵母解酯变种THP-1人急性白血病单核巨噬细胞株
葡糖-6磷酸转运蛋白抗体绿曲霉C2C12小鼠成肌细胞系
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泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶5抗体间型脉孢菌CT26.WT小鼠结肠癌细胞
乙型肝炎病毒cccDNA(HBV-cccDNA)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书酵母浸粉：5.0
乙型肝炎病毒cccDNA(HBV-cccDNA)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书酵母浸粉：5.0
氯化钠：10.0
琼脂：15.0
PH：7.0±0.2
用法：取本品4.0克,加热溶解于100ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟备用
质量控制和典型特征：接种10-100个Jm109、Hb101在36±1℃培养18-24小时生长明显
性状：干燥粉末。易吸湿。
用途：生化研究。用于发酵工程、基因工程和分子生物学中的培养
保存：RT
热门标签：乙型肝炎病毒ccc DNA HBV-cccDNA 检测试剂盒 荧光-PCR法
