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EB病毒(EBV)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书

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品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/2/22 21:17:19更新时间:2024/8/21 0:02:09

产品摘要:EB病毒(EBV)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书的热销产品:蛋白酶GCN2蛋白抗体Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白酶磷酸酶-1抗体IgGG蛋白偶联受体GPR78蛋白抗体A

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详细内容


服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
货号
规格
EB病毒(EBV)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书
GOY-01P64491
50T
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确,重现性好的定量方法,已得到全的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
链霉菌原癌基因8抗体Anti-IHH Antibody铁氧还蛋白1(FDX1)ELISA试剂盒
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芽孢杆菌肿瘤坏死因子受体相互作用蛋白抗体Anti-IKBKB Antibody(PB0219)天冬酰內肽酶(LGMN)ELISA试剂盒
柯氏黑蛋巢肿瘤坏死因子受体相关蛋白4抗体Anti-IKBKG Antibody天冬酰酶(ASPG)ELISA试剂盒
棒曲霉结构蛋白家族1抗体Anti-IKBKG Antibody天冬酰合成酶(ASNS)ELISA试剂盒
大肠埃希菌癌雌激素诱导蛋白抗体Anti-IKZF1 Antibody天冬酰氨肽酶(ASPEP)ELISA试剂盒
尖孢镰刀菌跨膜蛋白18抗体Anti-IL10 Antibody天冬酰氨基葡糖酶(AGA)ELISA试剂盒
酿酒酵母磷酸化雌激素反应指状蛋白抗体Anti-IL10 Antibody天冬氨酸转氨酶2(AST2)ELISA试剂盒
pBBRMCS-2磷酸化神经特异性微管蛋白抗体Anti-IKZF1 Antibody天冬氨酸转氨酶(AST)ELISA试剂盒
动物双歧杆菌瞬时受体电位离子通道蛋白7抗体(M亚家族)Anti-IKZF2 Antibody天冬氨酸酰酶3(ACY3)ELISA试剂盒
华美链霉菌“冷”蛋白TRPM8抗体Anti-IKKi/IKKe/IKBKE Antibody天冬氨酸甲氨酰转移酶(ATCase)ELISA试剂盒
芽孢杆菌瞬时受体电位离子通道蛋白3抗体(M亚家族)Anti-IL10 Antibody天冬氨酸β羟化酶(ASPH)ELISA试剂盒
立枯丝核菌(测序正确)雌激素反应锌指蛋白抗体Anti-IL10 Antibody特异性蛋白1(Sp1)ELISA试剂盒
绒毛栓菌TWIST蛋白2抗体抗体Anti-IL10 Antibody糖盏蛋白(GC)ELISA试剂盒
香菇磷酸化雌激素反应指状蛋白抗体Anti-IL10 Antibody糖原磷酸化酶M(PYGM)ELISA试剂盒
细胞分化蛋白SEPT8抗体羊毛链霉菌小鼠血管内皮细胞
细胞质和纺锤体机化蛋白A抗体羊肚菌属小鼠主动脉平滑肌细胞
丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白4抗体蛹虫草(北冬虫夏草,北虫草)小鼠大隐静脉内皮细胞
丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白3抗体蛹虫草(北冬虫夏草,北虫草)(斜面)小鼠主动脉内皮细胞
EB病毒(EBV)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书胶淀粉;淀粉精
 Amylopectin from potato starch
产品规格: BR,土豆来源
包装:1克/5克/50克
产品规格: BR,玉米来源
包装:25克/100克/500克
CAS号:9037-22-3
别:BR
比旋光度:165~185°(C=0.2 in 0.85% Sodium Chloride at 25℃)
水分:≤10.0%
杂质:≤0.1%
性状:粉末。土豆提取,无臭,无味。有吸湿性。不溶于冷水、乙醇。是借α(1→4)和约4%的α(1→6)糖苷键相连的支链葡糖单位组成的。与碘作用呈紫红色(大吸收波长540nm)。作为一种葡糖的聚合物除由α-1,4糖苷键联结葡糖而成直链外,还有以α-1,6糖苷键联结葡糖而成很多分支支链,分子呈树枝状。聚合度,即葡糖单位数目,约在1000~3000 000,形成不同大小的分子,其分子量即为聚合度与葡糖单位分子量162的乘积。支链淀粉构成天然淀粉的颗粒,以其不同于直链淀粉的性质影响天然淀粉的性质及相关的应用。如支链淀粉具有较高的黏性,“凝沉”(retrogradation)倾向较弱,比较稳定,不易“老化”、“回生”。β-淀粉酶只能消化其约50%。淀粉与碘反应呈红色。它存在于几乎所有源于粮谷类、薯类等农作物的天然淀粉中,约为淀粉的75%~80%。一些黏性的糯米、黏玉米中,则几乎全部为支链淀粉
用途:生化研究。支链酶测定
保存:RT

热门标签:EB病毒 EBV 检测试剂盒 荧光-PCR法  

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