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猪源性成分(Porcine)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书

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品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/2/22 21:18:29更新时间:2024/8/21 0:02:09

产品摘要:猪源性成分(Porcine)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书的热销产品:G蛋白偶联受体G2A抗体Anti-MMP-1/FITC 荧光素标记基质金属蛋白酶-1抗体G蛋白偶联受体1抗体Anti-MMP-2/FITC 荧光素标记基质金属蛋白酶-2抗体Ig

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详细内容

操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
货号
规格
猪源性成分(Porcine)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书
GOY-01P64495
50T
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确,重现性好的定量方法,已得到全的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
马特链霉菌髓系触发受体1抗体Anti-IL1B Antibody碳酸酐酶Ⅱ(CA2)ELISA试剂盒
樟疫霉胰蛋白酶抑制剂抗体Anti-IL1R1 Antibody碳酸酐酶Ⅰ(CA1)ELISA试剂盒
橙色农霉菌味觉感受器蛋白T2R6抗体Anti-IL2 Antibody碳分解代谢物阻遏4样蛋白(CCRN4L)ELISA试剂盒
多主葡座腔菌味觉感受器蛋白T2R38抗体Anti-IL2 Antibody热素受体2(ANTXR2)ELISA试剂盒
鼠李糖乳杆菌5色氨酸羟化酶2抗体Anti-IL2 Antibody肽酰甘氨酸α酰化单氧酶(PAM)ELISA试剂盒
毛柄金钱菌(金针菇)硫氧还蛋白11抗体Anti-IL2 Antibody肽酶抑制因子16(PI16)ELISA试剂盒
其他质粒菌种微管蛋白4α抗体Anti-IL22 Antibody肽酶抑制因子15(PI15)ELISA试剂盒
污黑腐皮壳动力蛋白轻链Anti-IL22 Antibody肽酶D(PEPD)ELISA试剂盒
佛罗里达侧耳肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2/TNFα-IP 8L2抗体Anti-IL2 Antibody肽聚糖识别蛋白2(PGLYRP2)ELISA试剂盒
茄腐镰刀菌血小板生成素受体抗体Anti-IL22 Antibody肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)ELISA试剂盒
棘腐霉跨膜丝氨酸蛋白酶5抗体Anti-IL2 Antibody肽基脯氨酰异构酶F(PPIF)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌脱中胚蛋白抗体Anti-IL23A Antibody肽基脯氨酰异构酶E(PPIE)ELISA试剂盒
杰丁毕赤酵母生长抑制基因1蛋白抗体Anti-IL23A Antibody肽基脯氨酰顺反式异构酶NIMA相互作用蛋白4(PIN4)ELISA试剂盒
嗜角蛋落霉甲状腺素T4抗体Anti-IL23R Antibody肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅵ(PADI6)ELISA试剂盒
粉红聚端孢霉转录因子CP2抗体Anti-IL25 Antibody肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅳ(PADI4)ELISA试剂盒
粉红单端孢甲基双加氧酶TET2抗体Anti-IL27 Antibody胎球蛋白B(FETUB)ELISA试剂盒
SCEL蛋白抗体白色食藻菌小鼠尿道上皮细
精子相关抗原8抗体迟缓爱德华氏菌(暂无)小鼠输尿管上皮细胞
T淋巴细胞识别的鳞状细胞抗原抗体皮氏罗尔斯通氏菌小鼠肾管状上皮细胞
信号转导衔接蛋白1抗体马氏链球菌小鼠子宫颈上皮细胞
猪源性成分(Porcine)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书交联葡聚糖凝胶G-75;交联右旋糖酐凝胶G-75
 Sephadex G-75
其他 Cross-inked dextran gel G-75
产品规格: 进分
包装:5克
产品规格: 进口原装
包装:100克
产品规格: 国产
包装:25克/100克
CAS号:37224-29-6
干颗粒直径:40~120um(细)
分子量分范围:A.肽及球形蛋白质:3000~80000;B. 葡聚糖(线性分子):1000~50000
床体积毫升/克干分子筛:12~15ml/g
得水值:7.5±0.5
溶胀少平衡时间(h):室温24h(20℃);沸水浴3h(90℃)
柱头压力(kpa)(2.5cm直径柱):3.92~15.86
PH:2~13
性状:白色珠粒,属亲水性凝胶。性稳定,不溶于水、弱酸和碱溶液,遇强酸能使糖苷键分解
用途:生化研究。用于凝胶过滤,蛋白及多糖的纯化和分离,分子量的测定
保存:RT

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