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转基因水稻TT51-1(BT63)基因检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书

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品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/2/23 19:04:33更新时间:2024/8/21 0:02:09

产品摘要:转基因水稻TT51-1(BT63)基因检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书的热销产品:磷酸化谷氨酸受体1抗体Anti-Nestin/RBITC 红色荧光素罗丹明(RBITC)标记巢蛋白/神经上皮干蛋白抗体IgGG蛋白偶联受体48抗体Anti-Nestin/

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详细内容

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
货号
规格
转基因水稻TT51-1(BT63)基因检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书
GOY-01P64523
50T
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确,重现性好的定量方法,已得到全的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
米氏假单胞菌磷酸化鸟嘌呤核苷酸交换因子VAV3抗体Anti-MCU Antibody固酮合酶(ALDOS)ELISA试剂盒
季也蒙假丝酵母囊泡相关膜蛋白相关蛋白A抗体Anti-MCM7 Antibody(PB0260)全色素C合酶(HCCS)ELISA试剂盒
克鲁维毕赤酵母癌基因VAV2抗体Anti-MDM2 Antibody全羧酶合成酶(HLCS)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌囊泡相关膜蛋白相关的蛋白BAnti-MDM4 Antibody去唾液酸糖蛋白受体2(ASGR2)ELISA试剂盒
土生类诺卡氏菌低密度脂蛋白受体抗体Anti-MDK Antibody去唾液酸糖蛋白受体1(ASGPR1)ELISA试剂盒
果疮痂芽枝霉神经视锥蛋白样1抗体(神经钙蛋白)Anti-MDM2 Antibody去甲肾上腺素转运蛋白(NET)ELISA试剂盒
酿酒酵母转录辅助因子退变样蛋白2抗体Anti-MDC1 Antibody去泛素化酶3(DUB3)ELISA试剂盒
动球菌转录辅助因子退变样蛋白4抗体Anti-MED14 Antibody去氨精氨酸加压素(DDAVP)ELISA试剂盒
糖螺菌丝氨酸/苏氨酸特定蛋白磷酸酶抗体Anti-MECP2 Antibody趋化因子C-基元受体1(XCR1)ELISA试剂盒
不规则分枝发簇孢血管生长因子VG5Q抗体Anti-MED13 Antibody趋化因子C-基元配体2(XCL2)ELISA试剂盒
无花果沙雷氏菌上皮型钙粘附分子抗体Anti-ME2 Antibody趋化因子C-X-C-基元受体7(CXCR7)ELISA试剂盒
米堆冰川居真菌细菌囊泡转运蛋白1家族蛋白抗体Anti-MED15 Antibody趋化因子C-X-C-基元受体6(CXCR6)ELISA试剂盒
薄花边伞6-2液泡分选蛋白4抗体Anti-MED20 Antibody趋化因子C-X-C-基元受体5(CXCR5)ELISA试剂盒
蘑菇线粒体外膜孔蛋白3抗体(电压依赖阴离子通道蛋白3)Anti-MED18 Antibody趋化因子C-X-C-基元受体4(CXCR4)ELISA试剂盒
小单孢菌视觉抑制蛋白抗体Anti-MED4 Antibody趋化因子C-X-C-基元受体3(CXCR3)ELISA试剂盒
异配囊接霉血管内皮生长因子受体3抗体Anti-MED6 Antibody趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)ELISA试剂盒
血清应答因子抗体脑膜炎奈瑟菌大鼠小梁网细胞
蛋白酶抑制剂14抗体白色链霉菌白色亚种大鼠视网膜色素上皮细胞
分泌素受体抗体Lentzeasp大鼠胎儿成纤维细胞
钠-糖共转运载体1抗体带小棒链霉菌大鼠表皮角质形成细胞
转基因水稻TT51-1(BT63)基因检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书间碘苯甲酸;3-碘苯酸;间碘苯酸
 3-Iodobenzoic acid
其他 m-Iodobenzoic acid
产品规格: BR,99.0%
包装:5克/25克/100克/500克
CAS号:618-51-9
别:BR
含量:≥99.0%
熔点:185~187℃
性状:至浅黄色针状结晶。能升华。溶于乙醇,微溶于水。熔点187~188℃。小致死量(小鼠,腹腔)200mG/kG
用途:生化研究。有机合成。
保存:RT,避光
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 

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