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CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/2/24 19:38:51更新时间:2024/8/21 0:02:09

产品摘要:CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒公司正在热销的产品:人钙联蛋白(CNX)ELISA试剂盒 人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA试剂盒人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒 人抗风疹病IgG抗体(anti-RV IgG)ELISA试剂盒

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详细内容

实验报告:
一、分离与培养:
    1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
    3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
    5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
    2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
    5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
    6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒
英文名称:CFSE Cell Proliferation and Tracking Kit
产品规格:2000T
发货周期:1~3天
CFSE细胞增殖与示踪检测试剂盒是基于一种新型荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。
基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致,但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数,同时如果和其它荧光探针联用,可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。
CFDA SE 的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式为C29H19NO11,分子量为557.47。CFDA SE可以通透细胞膜,进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应,并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时,即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数个月。CFSE标记细胞的荧光非常均一,比以使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。
由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半,这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2的荧光强度),分离两次的细胞(1/4的荧光强度),分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。
CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。常用于淋巴细胞的增殖检测,也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测,甚至还可以用于细菌增殖的检测。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
对氟酯 97%兔子组(HIS)免疫试剂盒间隙连接蛋白43抗体RELN/Reelin  络丝蛋白抗体
6-羟-2-吡啶羧 97%兔子总碱性酶(TALP)免疫试剂盒紧密连接蛋白25抗体RELMa/RELM alpha  抵抗素样分子α抗体
N-(2-羟乙)哌 98%兔子转化生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒中心体蛋白78抗体RELM beta/CCGR  结肠癌相关因蛋白抗体
2-羟 97%兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3)免疫试剂盒6号染色体开放阅读框146抗体RelB  转录因子RelB蛋白抗体
2-羟 99%兔子肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒6号染色体开放阅读框154抗体RelB  核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体
2-酚 95%兔子中性粒弹性蛋白酶(NE)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框16抗体Relaxin 1  松弛肽/松弛素抗体
(R)-(-)-5-羟-2-吡咯烷酮 99%兔子脂联素(ADP)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框78抗体Regucalcin/SMP30  衰老标记蛋白30抗体
(S)-(+)-5-羟-2-吡咯烷酮 98%兔子脂多糖/内素(LPS)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框79抗体REG4/RELP  再生因蛋白4抗体
(S)-1-Boc-3-羟吡咯烷 98%兔子脂蛋白脂酶A2(Lp-PLA2)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框84抗体Reg3a  胰岛β生长因子抗体
2-羟-4-三氟嘧啶 97%兔子粘蛋白1(MUC1)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框85抗体Reg3 gamma  胰岛β生长因子Reg IIIγ抗体
4-(1-羟乙)吡啶 98%兔子载脂蛋白B48(apo-B48)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框91抗体Reg3 beta  胰岛β生长因子Reg IIIα 抗体
4(5)-羟咪唑盐盐 98%兔子孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框93抗体REG1β/REG1 beta  胰岛再生因子β抗体
(R)-3-羟吡咯烷盐盐 98%兔子游离脂肪(FFA)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框96抗体REG1A  胰岛再生因子ICRF抗体
4-酯 98%兔子硬骨素(SOST)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框98抗体REF-1/APEX1  多功能DNA修复酶抗体
2-酯 98%兔子胰高血糖素(GC)免疫试剂盒分裂周期蛋白5样蛋白抗体REEP5  受体表达蛋白5/息肉相关蛋白抗体
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗体Human IQSEC2 ELISA Kit大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒,
肿瘤抑制相关蛋白PHEMX抗体Human IRAK4 ELISA Kit大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒,
精神分裂症与犰狳重复基因抗体Human IRF1 ELISA Kit大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒,
乙脱氢酶1型抗体Human IRF2BP1 ELISA Kit大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒,
磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体Human INTU ELISA Kit大鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒,
磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体Human INVS ELISA Kit大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒,
磷酸化腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体Human IRF2 ELISA Kit大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒,
磷酸化铁调节蛋白1抗体Human ISG20L2 ELISA Kit大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒,

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