实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：白细胞稀释液(计数液)
英文名称：

产品规格：100ml

发货周期：1～3天

用途：

用于白细胞计数

注意事项：

由乙酸等组成。

储存条件：室温，12个月
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

灭蝇标准溶液 10μg/ml,u=2%大鼠Rho相关GTP结合蛋白RhoE 免疫试剂盒硫乙酰肝素6脑苷脂转硫酶1抗体Goat Anti-Mouse IgM/Cy3  Cy3标记的羊抗小鼠IgM

草津 分析标准品，98%大鼠Rho鸟苷交换因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)免疫试剂盒神经保护肽HN抗体Goat Anti-Mouse IgM/Bio  生物素标记的羊抗小鼠IgM

霜脲 分析标准品，98.5%大鼠Ras相关蛋白Rab-11A 免疫试剂盒大鼠细小病H-1株(H-1)抗体（N端）Goat Anti-Mouse IgM/APC  APC标记的羊抗小鼠IgM

顺式菊酯  分析标准品，99%大鼠Ras相关C3肉素底物1(RAC1)免疫试剂盒透明质合成酶1抗体Goat Anti-Mouse IgM/AP  碱性酶（AP）标记的羊抗小鼠IgM

四螨 分析标准品，98.6%大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)免疫试剂盒缺氧诱导因子3α/HIF-3α抗体Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的羊抗小鼠IgM

四螨标准溶液 100μg/ml,u=4%大鼠P物质受体(SP-R)免疫试剂盒缺氧诱导因子脯氨酰4羟化酶抗体Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的羊抗小鼠IgM

四螨标准溶液 10μg/ml,u=6%大鼠P物质(SP)免疫试剂盒透明质酶2/玻璃酶2抗体Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的羊抗小鼠IgM

灭幼脲 分析标准品，97%大鼠P53(P53)免疫试剂盒心脏钙粘蛋白抗体Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的羊抗小鼠IgM

灭幼脲标准溶液 100μg/ml,u=4%，酮大鼠P27蛋白(P27)免疫试剂盒17-β-羟脱氢酶6抗体Goat anti-Mouse IgM whole serum  羊抗小鼠IgM抗血清

灭幼脲标准溶液 10μg/ml,u=6%，酮大鼠P21蛋白(P21)免疫试剂盒H5亚型全病抗体Goat Anti-Mouse IgM  羊抗小鼠IgM

 分析标准品，99%（剧品）大鼠P0蛋白抗体(IgG)免疫试剂盒人类疱疹病8 ORF14抗体Goat Anti-Mouse IgG/RBITC  罗丹明标记的羊抗小鼠IgG

标准溶液 100μg/ml,u=3%（剧品）大鼠P0蛋白(p0)免疫试剂盒透明质酶2/玻璃酶2抗体Goat Anti-Mouse IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的羊抗小鼠IgG

标准溶液 10μg/ml,u=6%（剧品）大鼠N-乙酰-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨(AcSDKP)免疫试剂盒同源盒蛋白B2抗体Goat Anti-Mouse IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的羊抗小鼠IgG

苄草隆 分析标准品,99.5%大鼠N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷酶(NAG)免疫试剂盒同源盒蛋白B8抗体Goat Anti-Mouse IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的羊抗小鼠IgG

丁硫溶液100μg/ml,溶剂:酮大鼠N－－D-天门冬氨(NMDA)受体亚单位NR2 免疫试剂盒热休克蛋白70家族蛋白6抗体Goat Anti-Mouse IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的羊抗小鼠IgG
白细胞稀释液(计数液)5号染色体开放阅读框33抗体Human ARRB2(Beta-arrestin-2) ELISA Kit人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PCK）ELISA试剂盒,

9号染色体开放阅读框89抗体Human ProHAMP(Hepcidin prohormone) ELISA Kit人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体（OJ/IleRS）ELISA试剂盒,

19号染色体开放阅读框66抗体Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人维生素C（VC）ELISA试剂盒,

21号染色体开放阅读框55抗体Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人凝血酶抗凝血酶复合物（TAT）ELISA试剂盒,

21号染色体开放阅读框70抗体Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人胰高血糖素样肽1（GLP-1）ELISA试剂盒,

胱抑素A/半胱氨酸蛋白酶抑制剂A抗体Human CDKN2C(Cyclin-dependent kinase 4 inhibitor C) ELISA Kit人皮肤蛋白（DPT）ELISA试剂盒,

8号染色体开放阅读框4抗体Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit小鼠横纹肌辅肌动蛋白α （sm Actinin-α）ELISA试剂盒,

CD73抗体Human EREG(Proepiregulin) ELISA Kit大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体（dsDNA）ELISA试剂盒,