实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：软骨染色液(阿利新蓝法,pH1.0)
英文名称：

产品规格：2×50ml

发货周期：1～3天

用途：

软骨染色，主要显示硫酸粘液物质

注意事项：

主要由酸化液、Alcian 染色液(PH1.0)组成。染色结果为：硫酸黏蛋白呈蓝色，细胞核呈浅蓝色。

储存条件：4℃，避光，12个月
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

异恶唑草酮 分析标准品，99%驴ELISA试剂盒葡萄糖氧化酶1抗体GLUT4  葡萄糖转运蛋白4抗体

氧菌酯 分析标准品，97%驴孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒转录调节因子HOXD9抗体GLUT3  葡萄糖转运蛋白3抗体

春雷霉素 分析标准品，72.5%驴透明质(HA)免疫试剂盒羟酰谷胱甘肽水解酶样蛋白抗体GLUT2  葡萄糖转运蛋白2抗体

春雷霉素盐盐 分析标准品，95%驴卵泡激素(FSH)免疫试剂盒热休克蛋白受体家族蛋白7B2抗体GLUT2  葡萄糖转运蛋白2

标准溶液100μg/ml,u=4%,溶剂:乙驴黄体生成素(LH)免疫试剂盒Heme结合蛋白2抗体GLUT12  葡萄糖转运蛋白12抗体

标准溶液10μg/ml,u=4%,溶剂:乙驴雌二(E2)免疫试剂盒肝粘附分子2抗体GLUT10/Glucose Transporter GLUT10  葡萄糖转运蛋白10抗体

氟禾草灵 分析标准品，74%鹿ELISA试剂盒氨己糖苷酶D抗体GLUT1  葡萄糖转运蛋白1抗体

虱螨脲 分析标准品，99.5%鹿胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)免疫试剂盒HHLA2蛋白抗体GLUR4  谷氨受体4抗体

紫精 分析标准品，99%鹿胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒羟脯氨抗体GLUR3/GRIA 3  谷氨受体3抗体

噻草 分析标准品，98.5%鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒热休克蛋白10抗体GLUR2  谷氨受体2抗体

磺隆 分析标准品，98%鹿尿氧化酶免疫试剂盒同源盒蛋白PRH抗体GluR1/AMPA  谷氨受体1抗体

磺隆标准溶液 100μg/ml,u=2%,溶剂:酮鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)免疫试剂盒羟类固脱氢酶17β抗体GLUR  谷胱甘肽还原酶抗体

磺隆标准溶液 10μg/ml,u=4% 鹿免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒疱疹病相关泛素特异性蛋白酶7抗体Glu-Glu Tag  Glu-Glu tag抗体

四聚乙 分析标准品，97%鹿氧化酶(XOD)免疫试剂盒同源异型盒因HOXA5蛋白抗体Glucose 6 phosphatase alpha  葡萄糖6酶α抗体

异草 分析标准品，98.5%鹿环腺苷(cAMP)免疫试剂盒异染色质蛋白1-α(HP1α)抗体Glucocorticoid receptor(GR)  糖皮质激素受体抗体
软骨染色液(阿利新蓝法,pH1.0)钙调节蛋白-1抗体Human ANXA4(Annexin A4) ELISA Kitβ-葡聚糖酶

半胱酸蛋白酶蛋白-6抗体（C端）Human TNNT3(Troponin T, fast skeletal muscle) ELISA Kit透析袋27DM

周期素A2抗体Human RAB11A(Ras-related protein Rab-11A) ELISA Kit人磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM（PI Ab-IgG/IgM）ELISA试剂盒,PI Ab-IgG/

钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体Human RELB(Transcription factor RelB) ELISA Kit人抗乙型肝炎病核心抗体（HBcAb）ELISA试剂盒, HBcAb ELISA

钙/钙调素依赖蛋白激酶2b/2γ抗体Human UCHL1(Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1) ELISA Kit人糖蛋白49A（Gp49a）ELISA试剂盒,Gp49a ELISA

凋亡敏感性基因抗体Human PA2G4(ProlifeRation-associated protein 2G4) ELISA Kit人抑制素B（INH-B）ELISA试剂盒,INH-B ELISA

天冬氨酸-胱氨酸特异性蛋白酶家族抗体Human PDXP(Pyridoxal phosphate phosphatase) ELISA Kit人刀豆素A（ConA）ELISA试剂盒, ConA ELISA

半胱酸蛋白酶-10抗体Human OAS3(2′-5′-oligoadenylate synthase 3) ELISA Kit人色氨酰tRNA合成酶（WARS）ELISA试剂盒,