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透明软骨染色液(Unna碱性美蓝法)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:透明软骨染色液(Unna碱性美蓝法)
英文名称:
产品规格:2×50ml
发货周期:1~3天
用途:
软骨染色,主要显示透明软骨
注意事项:
有碳酸钾、美蓝等组成。
储存条件:室温,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
禾草知标准溶液 10μg/ml,u=4%鲸ELISA试剂盒瘤病调控因子1抗体(锌指蛋白395)GLIPR2 脑胶质瘤发病相关蛋白2抗体
灭锈 分析标准品,99.5%鲸孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒人类状瘤病18 E6单克隆抗体GLIPR1 脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体
草酮 分析标准品,93%鲸状腺原氨(T3)免疫试剂盒异质核糖核蛋白F抗体Gliomedin/COLM 神经胶质蛋白(肝癌相关因2)抗体
杀扑 分析标准品,95%(剧品)鲸皮质(Cortisol)免疫试剂盒异质核糖核蛋白K抗体GLI1/Zfp5 脑胶质瘤相关蛋白抗体(锌指蛋白5)
杀扑标准溶液 10μg/ml,u=6~4%,酮(剧品)鲸状腺素(T4)免疫试剂盒异质核糖核蛋白L抗体GLCNE GLCNE蛋白抗体
菌唑 分析标准品,98.5%鲸睾酮(T)免疫试剂盒HER2受体单克隆抗体GLCCI1 糖皮质激素诱导转录蛋白1抗体
除草标准溶液 100μg/ml,u=4%鲸雌二(E2)免疫试剂盒癌分化因子P45抗体 HeregulinβGLB1L3 β半糖苷酶1样蛋白3抗体
除草标准溶液 10μg/ml,u=5%型流感ELISA试剂盒肝脂酶抗体GKRP 葡萄糖激酶调节蛋白抗体
灭菌丹标准溶液 100μg/ml,u=2%型流感H7N7 HA 免疫试剂盒化组蛋白去乙酰化酶1抗体GK5/Glycerokinase 5 甘油激酶5抗体
灭菌丹标准溶液 10μg/ml,u=6%型流感H5N1(Avian Flu)HA 免疫试剂盒解旋酶样转录因子抗体GJC2/Connexin 47 间隙连接蛋白47抗体
烟嘧磺隆 95%型流感H3N2 HA 免疫试剂盒三羟辅酶A合成酶2抗体GIT1 G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1
恶草酮 分析标准品,97.5%海狮ELISA试剂盒人类白抗原A抗体GIRK3/KCNJ9 G蛋白激活内向通道3抗体
恶草酮标准溶液100μg/ml,u=2%,溶剂:酮海狮孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒羟类固脱氢酶17β2抗体GIRK2/Kir3.2 G蛋白激活内流通道蛋白2抗体
恶草酮标准溶液10μg/ml,u=2%,溶剂:酮海狮状腺原氨(T3)免疫试剂盒羟类固脱氢酶17β-HSD抗体GIRK1 G蛋白激活内向通道1抗体
烯肟菌酯 分析标准品,90%海狮皮质(Cortisol)免疫试剂盒人肝单克隆抗体/肝特异性抗原抗体GIPC-2 胞浆区相关蛋白GIPC2抗体
透明软骨染色液(Unna碱性美蓝法)c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗体Human GDF2(Growth/differentiation factor 2) ELISA KitB BL琼脂培养基用于双歧杆分离培养(GB标准)
Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体Human OSMR(Oncostatin-M-specific receptor subunit beta) ELISA KitL-色氨酸
Ⅲ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白抗体Human OIT3(Oncoprotein-induced transcript 3 protein) ELISA KitL-酪氨酸二钠盐
IV型胶原蛋白/4型胶原蛋白/胶原蛋白4抗体Human DEFA5(Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit随机引物
列腺素氧化环化酶1抗体Human CTSG(Cathepsin G) ELISA Kit苯甲酸酐
Ⅰ型胶原抗体Human PRKAB1(5′-AMP-activated protein kinase subunit beta-1) ELISA Kit萘酚AS-BI磷酸盐
Ⅴ型胶原抗体Human GNRHR(Gonadotropin-releasing hormone receptor) ELISA Kit四正丁基化铵
Ⅹ型胶原抗体Human MCAM(Cell surface glycoprotein MUC18) ELISA Kit代苯
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。