实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：Goldner三色染色液
英文名称：

产品规格：6×50ml|6×100ml

发货周期：1～3天

用途：

又称戈德纳三色染色液，主要用于骨组织染色。

注意事项：

可不脱钙染色，可用MMA塑料包埋，脱塑后直接染色。

储存条件：室温，避光，12个月
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

菊酯标准溶液 10μg/ml,u=6%，体：石油植物茄呢酶1(SPS1/SPPS/SPS)免疫试剂盒化胰岛素受体底物-1抗体GDNF Receptor alpha 2  胶质系源性神经营养因子受体α2抗体

对硫 分析标准品，99%（剧品）植物激素脱落(ABA)免疫试剂盒化胰岛素受体底物-1抗体GDNF  胶质源性神经营养因子抗体

对硫标准溶液 100μg/ml,u=4%（剧品）植物活性氧(ROS)免疫试剂盒化胰岛素受体底物-1抗体GDN/SERPINE2  胶质源性连接蛋白抗体

对硫标准溶液 10μg/ml,u=6%（剧品）植物环腺苷(cAMP)免疫试剂盒白介素28B抗体GDIA2/ARHGDIB  肿瘤转移抑制因GDIA2抗体

腐霉利  分析标准品植物环鸟苷(cGMP)免疫试剂盒即刻早期应答因2蛋白抗体GDIA1  肿瘤转移抑制因GDIA1抗体

腐霉利标准溶液 100μg/ml,u=3%植物花生四烯(AA)免疫试剂盒三肌抗体GDF9  生长分化因子9抗体

腐霉利标准溶液 10μg/ml,u=6%植物过氧化氢酶2(CAT2/CAT)免疫试剂盒白介素18结合蛋白抗体GDF9  生长分化因子9抗体

霸草灵 分析标准品，99%植物钙调素(CaM)免疫试剂盒草酰琥珀脱羧酶抗体GDF8/MSTN  生长分化因子8抗体

吡 分析标准品，98.5%植物L-抗坏血过氧化物酶3,过氧化物酶病(APX3)免疫试剂盒IgLON家族蛋白5抗体GDF8  生长分化因子8/肌肉抑制素抗体

 10μg/ml,u=6～5%，酮植物L-抗坏血过氧化物酶2,质(APX2)免疫试剂盒锌指蛋白IKAROS抗体GDF8  生长分化因子8/肌肉抑制素抗体

敌稗 分析标准品，98%植物1,5-二核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)免疫试剂盒免疫球蛋白j链抗体GDF3  生长分化因子3抗体

敌稗标准溶液 100μg/ml,u=3%植物(拟南芥)超氧化物歧化酶[铜锌]2,叶绿体(CSD2)免疫试剂盒5-三肌受体1抗体GDF15/MIC-1  生长分化因子15/巨嗜抑制因子1抗体

敌稗标准溶液 10μg/ml,u=4%植物(拟南芥)超氧化物歧化酶[铜锌]1(CSD1)免疫试剂盒5-三肌受体2抗体GDF10  生长分化因子10抗体（TGF-β超家族10）

伏杀硫标准溶液 10μg/ml,u=7～3%，酮植物(拟南芥)超氧化物歧化酶[铁],叶绿体(SODB)免疫试剂盒DNA结合抑制因子3抗体GDF-1  生长、分化因子1抗体

伏杀硫标准溶液 100μg/ml,u=7～3%，酮 植物(拟南芥)超氧化物歧化酶[锰],线粒体(SODA)免疫试剂盒诱导协同激分子配体CD275抗体GDAP2  神经节苷脂诱导分化相关蛋白2抗体
Goldner三色染色液半胱酸蛋白酶蛋白9-p10抗体Human FNDC5(Fibronectin type III domain-containing protein 5) ELISA KitFMOC-L-苏氨酸

C型凝集素结构域家族5成员A抗体Human PLK1(Serine/threonine-protein kinase PLK1) ELISA Kit甲基白蛋白

周期素依赖激酶1抗体Human NR3C1(Glucocorticoid receptor) ELISA Kit固红RC

衰老抑制基因抗体Human NDUFS8(NADH dehydrogenase [ubiqui] iron-sulfur protein 8, mitochondrial) ELISA Kit人Ⅰ型胶原（ColⅠ）ELISA试剂盒,Col Ⅰ ELISA kit

环腺苷酸应答元件结合蛋白抗体Human NDUFS7(NADH dehydrogenase [ubiqui] iron-sulfur protein 7, mitochondrial) ELISA Kit人卵清蛋白特异性IgE（OVA sIgE）ELISA试剂盒,OVA s, AFA/snoRNP/

酪蛋白激酶1γ1抗体Human PRAP1(Proline-rich acidic protein 1) ELISA Kit人抗载脂蛋白抗体A1（Apo A1）ELISA试剂盒, Apo A1 ELISA kit

21号染色体开放阅读框88抗体Human CXCL14(C-X-C motif chemokine 14) ELISA Kit人抗增殖核抗原抗体（PCNA）ELISA试剂盒,PCNA ELISA

21号染色体开放阅读框54抗体Human SDCCAG3(Serologically defined colon cancer antigen 3) ELISA Kit人抗心磷脂抗体IgA（ACA-IgA）ELISA试剂盒,ACA-IgA ELISA KIT