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Weigert弹力纤维染色液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:Weigert弹力纤维染色液
英文名称:
产品规格:3×50ml
发货周期:1~3天
用途:
弹力纤维染色
注意事项:
又Weigert树脂酚复红染色液,主要显示成熟的弹力纤维。主要由碱性品红、间苯二酚、三、VG等组成。
储存条件:4℃,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
三七皂甙 R1 分析标准品,≥98% (HPLC)胰岛抗原12/核转录因子SOX13抗体FAM150A FAM150A蛋白抗体
齐墩果 分析标准品,>98%有丝分裂相关蛋白INSC抗体FAM13C1 FAM13C1蛋白抗体
齐墩果 97%化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗体FAM13B1 FAM13B1蛋白抗体
麦冬皂苷D 分析标准品,>98%RAN结合蛋白7抗体FAM135B FAM135B蛋白抗体
补骨脂素 分析标准品,≥98%兔抗人γ-链FAM134C FAM134C蛋白抗体
芍药苷 ≥98% (HPLC)免疫球蛋白超家族成员B抗体FAM129B FAM129B蛋白抗体
3,4-二羟 分析标准品, ≥97.0% (HPLC)六肌激酶3抗体FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein 生长抑制因39蛋白抗体
紫杉 98%干扰素kappa蛋白抗体FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X 肾母瘤因X染色体蛋白抗体
胡椒碱 分析标准品,>98% 白介素1α/IL-1α抗体FAM123B/AMER1 肾母瘤X蛋白抗体
植 90%,用于分子生物学白介素1α/IL-1α抗体FAM120C 构成激活过氧化酶活化增生受体γ样蛋白2抗体
植 分析标准品化白介素2受体β链抗体FAM120B 组织激活过氧化酶活化增生受体γ蛋白抗体
虎杖苷 分析标准品胰岛素样蛋白3抗体FAM113A FAM113A蛋白抗体
虎杖苷 98%内质网核信号转导蛋白a1抗体FAM107A 肾癌下调蛋白1抗体
贝母素乙 分析标准品,>98%重组人白介素18抗体FAM104B FAM104B蛋白抗体
盐巴马汀 分析标准品α胰蛋白酶重链H4抗体FAM102B FAM102B蛋白抗体
Weigert弹力纤维染色液白喉酰生物合成样蛋白2抗体Human UCN2(Urocortin-2) ELISA Kit氟铝酸钠
Notch信号通路Delta样配体3抗体Human ITPA(Inosine triphosphate pyrophosphatase) ELISA Kit人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒,
动力蛋白激活蛋白2抗体Human RAB8A(Ras-related protein Rab-8A) ELISA Kit人抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒,ACA-IgM ELISA
视神经相关蛋白/早老素结合蛋白抗体Human NDRG1(Protein NDRG1) ELISA Kit人孕/孕酮(PROG)ELISA试剂盒,PROG ELISA
DHX螺旋酶抗体Human GBA(Glucosylceramidase) ELISA Kit人二氢嘧啶酶样3(DPYSL3)ELISA试剂盒,DPYSL3 ELISA
转运蛋白DISP2抗体Human VSNL1(Visinin-like protein 1) ELISA Kit人磷酯酶Cγ链(PLCγ1)ELISA试剂盒, PLCγ1 ELISA
DNA聚合酶α2抗体Human OGG1(N-glycosylase/DNA lyase) ELISA Kit人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA试剂盒, Tyk-2 ELISA
短链脱氢酶/还原酶家族7B抗体Human FASN(Fatty acid synthase) ELISA Kit人胰淀粉酶(PAMY)ELISA试剂盒,
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