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肌纤维染色液(Puchtler鞣酸偶氮荧光桃红法)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:肌纤维染色液(Puchtler鞣酸偶氮荧光桃红法)
英文名称:
产品规格:5×50ml
发货周期:1~3天
用途:
肌纤维染色,可区分肌纤维和胶原纤维
注意事项:
肌纤维和肌上皮细胞呈玫瑰红色,胶原纤维呈黄色。
储存条件:4℃,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
2-羟异丁 98%化活化蛋白激酶B抗体Ephrin B Ephrin B抗体
α-羟异丁酯 98%化活化蛋白激酶B抗体Ephrin A5 酪氨蛋白激酶A5受体抗体
4-氧酰 97%化组蛋白去化酶JMJD2B抗体Ephrin A3/EFNA3 酪氨蛋白激酶A3受体抗体
对氧 CP,98.0%丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗体Ephrin A2/LERK6 Ephrin A2抗体
对氧 98%丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白3抗体EphB6 酪氨蛋白激酶受体B6抗体
3-氧 98%化氨末端激酶1/2/3抗体EPHB4 酪氨蛋白激酶受体B4抗体
3-酰 98%化蛋白质酪氨激酶JAK-1抗体EphB2/Eph receptor B2 酪氨蛋白激酶受体B2抗体
CP(剧品)氨末端激酶2抗体EphB2 R 酪氨蛋白激酶受体B2抗体
99%(剧品)连接介导调节蛋白抗体EphB1+EphB2+EphB3+EphB4 酪氨蛋白激酶受体B1+B2+B3+B4抗体
分析标准品氨末端激酶3抗体EphB1+EphB2 酪氨蛋白激酶受体B1+B2抗体
Standard for GC化活化蛋白激酶B抗体EphB1/Eph receptor B1 酪氨蛋白激酶受体B1抗体
原三乙酯 97% JmjC结构域组蛋白去化酶H3-K36抗体EphA8/Eph receptor A8 酪氨蛋白激酶受体A8抗体
2,2-偶氮二异丁 98%组蛋白去化酶JARID2抗体EphA7/Eph receptor A7 酪氨蛋白激酶受体A7抗体
2,2-偶氮二异丁 99%JAK和微管相互作用蛋白2抗体(JAK和微管相互作用蛋白2)EphA6/Eph receptor A6 酪氨蛋白激酶受体A6抗体
乙 98%活化蛋白激酶B抗体EphA5/Eph receptor A5 酪氨蛋白激酶A5受体抗体
肌纤维染色液(Puchtler鞣酸偶氮荧光桃红法)双PHD-D4锌指蛋白2抗体Human LARP7(La-related protein 7) ELISA Kit植物维生素B12(VB12)ELISA试剂盒,
双特异性磷酸酶22抗体Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) ELISA Kit白介素9(IL-9)ELISA试剂盒--动物,人
Erdj5/DNAJC10蛋白抗体Human COL7A1(Collagen alpha-1(VII) chain) ELISA Kit幽门螺旋IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒--动物,人
肿瘤调亡素/肿瘤坏死因子受体死亡受体6抗体Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) ELISA KitHE 琼脂(HE)
跨膜TMIGD1蛋白抗体Human BDG(beta-D-glucan) ELISA KitG C琼脂用于淋球的分离培养(OXOID方法)
轴丝中链动力蛋白抗体Human TAT (Tyrosine aminotransferase) ELISA KITL-苏氨酸
轴丝动力蛋白7抗体Human SKI (Ski oncogene) ELISA KITL-去甲肾上腺素
环指蛋白19抗体Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit白屈菜碱 Chelidonine
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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