中文名称：Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制剂)
英文名称：Caspase 4 Inhibitors Z-VAD-FMK

产品规格：20μl

浓度：5mM in DMSO

分子式：C21H28FN3O7

分子量：453.5

含量：77～97%(TLC)

纯度：≥92%(HPLC)

储存：-20℃，有效期6个月
实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

4-(2-噻唑偶氮)间二酚 97%化端粒酶逆转录酶抗体

2,3,5,6-四氟酚 AR,98.0%  化结节性硬化症蛋白1抗体

3,4-二硫酚 97%化结节性硬化蛋白抗体

化四砷 97%化结节性硬化蛋白抗体

三化铵 99%化结节性硬化蛋白抗体

硝 99.999%（剧品）化结节性硬化蛋白抗体

N-(硅烷)乙酰 97%化结节性硬化蛋白抗体

N-(硅烷)乙酰 95%肿瘤坏死因子受体1抗体

三(2-呋喃)膦 99%肿瘤蛋白p53诱导蛋白13(肿瘤抑制因)

4-(三氟氧) 97%增生肉蛋白1抗体

3-(三氟)苄 98%跨膜蛋白166抗体

4-(三氟) 99%跨膜蛋白超家族9-1抗体

1-(3-三氟)哌 98%肿瘤坏死因子配体超家族成员7抗体

4-(三氟) 98%结构蛋白家族3抗体

三(2-噻吩)膦 98+%T淋巴受体α抗体
Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制剂)胰高血糖素受体抗体Human TEX38 ELISA Kit小鼠绒毛膜促性腺(CG)Elisa测定试剂盒

生长分化因子3抗体Human TFAM(TFAM) ELISA Kit大鼠球蛋白A（IgA）Elisa测定试剂盒

磷酸化糖原合酶激酶3β抗体Human TFE3 ELISA Kit大鼠去甲肾上腺素(NA)Elisa测定试剂盒

G蛋白偶联受体1抗体Human TEX12 ELISA Kit整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型（抗体流式组化）

G蛋白β1抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基1Human TEX11 ELISA Kit酪氨酸激酶A抗体流式组化（神经生长因子受体的一种）IHC WB

G蛋白β3抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基3Human TEX14 ELISA KitL-半胱氨酸

鸟苷酸还原酶2抗体Human TEX13A ELISA Kit5-溴-4氯-3-吲哚N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷

G蛋白偶联受体γ12抗体Human TEX15 ELISA KitL-阿拉伯糖
注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。