实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：PD 98,059(MAPKK抑制剂)
英文名称：

产品规格：2mg

PD98059是一种非ATP 竞争性的MEK 抑制剂，IC50为2 μM，特异性抑制MEK-1介导的MAPK 激活；不直接抑制ERK1或ERK2。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

盐呋喃它酮  分析标准品，99.8%化血管扩张激蛋白抗体

胭脂红标准溶液0.50mg/ml,溶剂：水化血管内皮生长因子受体2抗体

金标准溶液100.0μg/g，体:0.5mol/l盐化血管内皮生长因子受体2抗体

钆标准溶液 1000µg/mL，体：10%HCl化血管内皮生长因子受体2抗体

三标准溶液0.001g/ml,溶剂:水血管内皮粘附分子抗体

三标准溶液0.0001g/ml,溶剂:水缬氨抗体

人参皂苷Rg1纯度标准物质 99.6×10-2血管粘附蛋白1抗体

alpha-六六六标准溶液50μg/ml,体::(4:1)间粘附蛋白Vinexin抗体

噻螨酮标准溶液 1.00mg/ml波形蛋白抗体

六标准溶液 0.103mg/ml，体：异辛烷维生素A抗体

六标准溶液 0.101mg/ml，体：异辛烷蛋白聚糖Versican抗体

钬标准溶液 1000μg/mL，体:10%HCLVWCE抗体

β-六六六标准溶液 50.0µg/mL，体：:=4:1视神经视网膜相关蛋白VAX1抗体

δ-六六六标准溶液 50µg/mL，体：:=4:1视神经视网膜相关蛋白VAX2抗体

水硬度标准溶液 45.0mmol/l(以CaCO3计)，体:0.1mol/L HCl维生素D3受体抗体
PD 98,059(MAPKK抑制剂)结合球蛋白β抗体Human STIM2 ELISA Kit獐牙菜苦苷

海马丰富基因转录蛋白1抗体Human STARD3NL ELISA Kit何乌

组蛋白H2AZ抗体Human STEAP4(STEAP family member 4) ELISA Kit夏枯草

热休克因子2结合蛋白抗体Human STARD5 ELISA Kit肉苁蓉

HEATR2蛋白抗体Human STIP1 ELISA Kit江南卷柏

铁硫簇整合同源物2蛋白抗体Human STEAP3 ELISA Kit槐角

麻疹病血凝素抗体Human STEAP2 ELISA Kit高良姜

同源盒蛋白HOXC5抗体Human STIM1 ELISA Kit紫色姜