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PI3K抑制剂
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详细内容
中文名称:PI3K抑制剂
英文名称:3-Methyladenine
产品规格:1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg|500mg
3-Methyladenine是一种选择性的PI3K抑制剂,能够作用于Vps34和PI3Kγ,IC50值为25μM和60μM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:5142-23-4
别名:3-MA
纯度:99.84%
分子量:149.15
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
钕标准溶液 1000μg/mL,体:10%HClWDR23蛋白抗体
氨氮标准溶液 100.0mg/L,体:H2SO4端粒酶卡哈尔体蛋白抗体
氨氮标准溶液100mg/L(以N计),溶剂:水信号通路WNT10B抗体
标准溶液 1.01mg/ml,体:EBV核蛋白2抗体
硝盐氮标准溶液 1000μg/mlWnt信号受体蛋白抗体
亚硝盐氮标准溶液 100mg/L(以N计),体:水富含脯氨同源蛋白1抗体
液相色谱仪检定用标准物质(萘-溶液) 10-7g/mL,体:原癌因WIP1抗体
液相色谱仪检定用标准物质(萘-溶液) 0.0001g/mL,信号通路Wnt2B抗体
镍标准溶液1000μg/mL,体: 1%硝WEE1蛋白抗体
类混合标准溶液 0.97mg/ml,体:WRCH1抗体
对硝标准溶液 1.04mg/ml,体:丝氨/苏氨激酶家族成员的因WNK3抗体
水中总氮标准溶液 500mg/L信号通路Wnt9a抗体
总有机碳(TOC)标准溶液 1000mg/L,体:水Wnt1信号通路蛋白1抗体
八氟萘溶液 100pg/μL,体:异辛烷WASP结合蛋白抗体
有机农药混合标准溶液野生型P53诱导因1抗体
PI3K抑制剂羟类固脱氢酶17β3抗体Human UBE2I(SUMO-conjugating enzyme UBC9) ELISA KitD-葡萄糖-6-磷酸二钠盐
羟基类固脱氢酶11β1抗体Human STAC ELISA KitD-半乳糖
滋养层抗原3β-HSD抗体Human SSX5 ELISA Kit麦芽糖一水合物
乙酰化组蛋白H4抗体Human SSX2IP ELISA Kit多聚半乳糖醛酸
磷酸化高迁移率核小体结合蛋白1Human SRR ELISA Kit巯基乙酸
附睾分泌蛋白4抗体Human SRPX2 ELISA Kit1-甲基-2-吡咯烷酮
基化组蛋白H3抗体Human SRRM1 ELISA Kit角鲨烷
三羟基基辅酶A还原酶抗体Human C1QTNF3(Complement C1q tumor necrosis factor-related protein 3) ELISA Kit磷酸三正丁酯