实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：(+)-JQ-1
英文名称：(+)-JQ-1

产品规格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg|1g

(+)-JQ-1是一种BET bromodomain抑制剂，抑制BRD4(1)和BRD4(2)的IC50分别为77 nM和33 nM。(+)-JQ-1激活自噬。在DMSO中的溶解度≥ 45 mg/mL (98.47 mM)。

注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！

CAS号：1268524-70-4

别名：JQ1

纯度：99.90%

分子量：456.99

结构式：

(+)-JQ-1结构式

保存条件：4℃，有效期2年。溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

重铬 分析标准品，99.998%Wolfram综合征蛋白1抗体

重铬标准溶液0.1mol/L化赖氨缺陷型蛋白激酶1抗体

邻二氢 核磁共振定量标准，99.998%WNK4抗体

高锰标准溶液1/5KMnO4：0.1011mol/L包含氧化还原酶的WW域抗体

对硫标准溶液 1.00mg/mL，体：（剧品）色氨丰富蛋白抗体

环唑标准溶液 1.00mg/mlX射线修复交叉互补蛋白抗体

 0.105mg/mlDNA补充修复XPC蛋白抗体

敌稗标准溶液 0.100mg/mlDNA损伤修复酶ERCC3蛋白抗体

伏杀硫标准溶液 0.105mg/mlX射线修复交叉互补蛋白3抗体

克螨特标准溶液 1.00mg/mlX射线修复交叉互补蛋白4抗体

嘧啶 0.100mg/ml乙型肝炎病X蛋白反转录蛋白4抗体

标准溶液 体: 1％HCl钙离子通道阻端耐药蛋白CCBR1抗体

溴化 分析标准品，99.94%X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体

 分析标准品，99.95%核转录因子X盒结合蛋白抗体

镨标准溶液 1000μg/mL，体：10%HCl乙型肝炎病X蛋白HBX抗体
(+)-JQ-1肝源性纤维蛋白原相关蛋白1抗体Human SSRP1 ELISA Kit茜草

红分化相关基因蛋白抗体Human SSSCA1 ELISA Kit美托洛尔

同源异型盒基因HOXA13抗体Human SRGAP3 ELISA Kit卡铂

磷酸化组蛋白去乙酰化酶4(Ser246)抗体Human SSTR3 ELISA Kit联苯苄唑

磷酸化组蛋白去乙酰化酶7抗体Human SRI ELISA Kit萝巴新

磷酸化组蛋白去乙酰化酶4抗体Human FZD3(Frizzled-3) ELISA Kit枸橼酸锌

磷酸化组蛋白去乙酰化酶7抗体Human SSTR5 ELISA Kit泛昔洛韦

HIRA相互作用蛋白3抗体Human ST6GALNAC5 ELISA Kit盐酸吡格列酮