实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：Btk抑制剂(PCI-32765)
英文名称：PCI-32765

产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

PCI-32765是具有选择性的Btk的不可逆抑制剂，IC50值为0.5nM。

注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！

CAS号：936563-96-1

别名：Ibrutinib

纯度：99.87%

分子量：440.5

储存条件：-20℃避光，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

标准溶液 1000µg/mL，体:1%HCl化非受体型酪氨蛋白激酶抗体

标准溶液 100µg/mL，体:1%HCl 化非受体型酪氨蛋白激酶抗体

标准溶液 1000μg/ml分泌型免疫球蛋白A抗体

标准溶液 500mg/L，溶剂：水S期激酶相关蛋白2抗体

标准溶液 体: 1％HCl蛇蛋白抗体（中华眼镜蛇）

镨标准溶液 1000μg/ml硒蛋白W抗体

镨标准溶液 1000μg/mL，体：10%HCl干生长因子抗体

酚标准溶液 1000μg/ml质衍生因子－1抗体

根标准溶液 1000μg/ml臂板蛋白3A抗体

钌标准溶液 1000μg/ml臂板蛋白3F抗体

铑标准溶液 1000μg/ml臂板蛋白4C抗体

铷标准溶液 1000μg/ml钠-糖共转运载体1抗体

铼标准溶液 1000μg/ml富含脯氨突触相关蛋白SHANK1抗体

二氧化硅标准溶液 1000μg/ml性激素结合球蛋白抗体

钠标准溶液 1000μg/ml造血酶抗体
Btk抑制剂(PCI-32765)肝生长因子激活蛋白抗体Human CD3d(Cluster of Differentiation 3d) ELISA KitD-核糖

肝癌衍生生长因子抗体（高迁移率族蛋白1样蛋白2抗体）Human SLC22A2 ELISA Kit羟甲基琼脂糖凝胶FF

磷酸化组蛋白H3抗体Human SLC25A1 ELISA Kit2-氨基-5-萘酚-7-磺酸

核糖基转移酶1抗体Human SLC1A4 ELISA Kit3-磺酸钠

乙酰化组蛋白H3抗体Human SLC25A11 ELISA Kit无水磷酸二氢钠

乙酰化和磷酸化组蛋白H3抗体Human SLC19A3 ELISA Kit2,4,6-三溴酚

组蛋白H2A抗体Human SLC25A3 ELISA Kit硫酸镉

乙酰化组蛋白H2A抗体Human SLC20A1 ELISA Kit大豆苷元