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中文名称：Porcupine抑制剂(LGK974)
英文名称：LGK974

产品规格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

LGK974是一种有效的特异性的Porcupine(PORCN)抑制剂，也有效抑制Wnt信号通路，IC50为0.4nM。

注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！

CAS号：1243244-14-5

纯度：98.97%

分子量：396.44

储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

六氟四丁 98%髓样分化蛋白抗原

3－－1- 98%周围神经髓鞘蛋白2抗原

二酯 99%MYSM1抗原

双乙钠 99%MYOZ抗原

溴化锂 99.9% metals basis烟碱型乙酰胆碱受体α7(多肽)

塑料购物篮 520mm*330mm*260mm干关键蛋白(多肽)

DL-肉碱盐盐 98%纳曲酮偶联牛血清白蛋白：纳曲酮偶联血蓝蛋白

全氟丁磺酰氟 96%核小体组装蛋白1（多肽）

噻虫啉  分析标准品N-钙粘附分子抗原

噻虫啉E-钙粘附分子抗原

6-氧-1-萘满酮 99%去氧肾上腺素

神经粘蛋白抗原

2型神经纤维瘤抗原

活化T核因子1蛋白

化核因子/化k因结合核因子抗原
Porcupine抑制剂(LGK974)离子通道蛋白家族成员3抗体Human PMFBP1 ELISA KitTaq plus酶

角蛋白82抗体Human KRT6A(KeRatin, type II cytoskeletal 6A) ELISA KitT3 RNA聚合酶

20号染色体开放阅读框19抗体Human PNMA2 ELISA Kit对-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷

角膜蛋白多糖抗体Human PMFBP1 ELISA Kit缩节

含赖氨酸卷曲螺旋蛋白1抗体Human KRT6A(KeRatin, type II cytoskeletal 6A) ELISA Kit聚乙二醇10000

激肽释放酶3/舒血管素3抗体Human PMF1 ELISA Kit3-甲氧基酚

上皮锌指蛋白1, 2, 4抗体Human PLS1 ELISA Kit萘酚AS-MX磷酸盐

肠道内富含的Kruppel样因子/上皮锌指蛋白4抗体Human PLP2(Proteolipid protein 2) ELISA Kit对二氯苯
注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。