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Wnt抑制剂(IWR-1)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:Wnt抑制剂(IWR-1)
英文名称:IWR-1
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
IWR-1是一种Wnt抑制剂,在L Wnt-3A细胞中,IC50值为180nM,通过稳定Axin破坏复合体来提高β-连环素的磷酸化。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1127442-82-3
别名:endo-IWR 1;IWR-1-endo
纯度:99.83%
分子量:409.44
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
二硫化四乙秋兰姆 97%Anti-LRP6 低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体人小表皮粘蛋白(SBEM)酶联免疫吸附测定试剂盒
雄烯二酮 分析标准品,≥99%Anti-Phospho-LRP6 (Ser1490) 化低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体人协同激分子受体(CMR)酶联免疫吸附测定试剂盒
雄烯二酮 99%Anti-LRRC4 脑瘤相关因抗体人TERF1相互作用核因子2(TINF2)酶联免疫吸附测定试剂盒
芦荟甙 分析标准品,≥97%Anti-LRRK2 富亮氨重复激酶2抗体人抗促状腺素受体抗体(TRAb)酶联免疫吸附测定试剂盒
芦荟甙 97%Anti-LTB4/Leukotriene B4 白三烯B4抗体人信号识别颗粒(SRP9)酶联免疫吸附测定试剂盒
牛蒡子苷元 分析标准品,>98% Anti-LTB4-R1 白三烯B4受体1抗体人神经穿透素1(NPTX1)酶联免疫吸附测定试剂盒
牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)Anti-LTB4-R2 白三烯B4受体2抗体人吻素1(KISS1)酶联免疫吸附测定试剂盒
积雪草苷 分析标准品,≥97%Anti-Iumbrokinase 蚓激酶抗体人信号传导转录激活因子1(STAT1)酶联免疫吸附测定试剂盒
黄芪皂苷 III 分析标准品,≥98%Anti-Lxn 羧肽酶抑制剂抗体人信号传导转录激活因子2(STAT2)酶联免疫吸附测定试剂盒
黄芪皂苷 II 分析标准品,≥98%Anti-Ly-6G/Gr-1 淋巴抗原6G抗体人信号传导转录激活因子3(STAT3)酶联免疫吸附测定试剂盒
土木香内酯 分析标准品,≥97%(HPLC)Anti-LY-86/MD-1 MD-1蛋白抗体人信号传导转录激活因子4(STAT4)酶联免疫吸附测定试剂盒
穗花牡荆甙 分析标准品,≥98% Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗体人信号传导转录激活因子5A(STAT5A)酶联免疫吸附测定试剂盒
桃叶珊瑚苷 分析标准品,≥98%Anti-Lysozyme 溶菌酶抗体人信号传导转录激活因子6(STAT56)酶联免疫吸附测定试剂盒
白果内酯 分析标准品,≥99%Anti-Lyn 膜相关蛋白酪氨激酶Lyn抗体人信号传导转录激活因子6B(STAT56B)酶联免疫吸附测定试剂盒
巴卡丁 III 分析标准品,≥99%Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相关蛋白酪氨激酶Lyn抗体人性别决定区Y框蛋白1(SOX1)酶联免疫吸附测定试剂盒
Wnt抑制剂(IWR-1)染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体Human GDF5(Growth/differentiation factor 5) ELISA Kit唾液弯曲杆探针法荧光定量PCR试剂盒
单羧酸转运蛋白-1抗体Human HSPG2(Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein) ELISA Kit伊丽莎白巴尔通体探针法荧光定量PCR试剂盒
线粒体核糖体蛋白L11抗体Human TEP1(omerase protein component 1) ELISA Kit饰纹汀蛙虹彩病探针法荧光定量PCR试剂盒
促血管平滑肌分化因子抗体Human CSTA(Cystatin-A) ELISA Kit病探针法荧光定量PCR试剂盒
跨膜结构域4亚家族成员2抗体Human HBA1(Hemoglobin subunit alpha) ELISA Kit牛杆探针法荧光定量PCR试剂盒
磷酸化致癌基因C-Myc抗体Human SULF2(Extracellular sulfatase Sulf-2) ELISA Kit犬轮状病探针法荧光定量PCR试剂盒
肌收缩蛋白MYOT抗体Human STEAP1(Metalloreductase STEAP1) ELISA Kit副百日咳波氏杆探针法荧光定量PCR试剂盒
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体Human HIF1AN(Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor) ELISA Kit牛仰口线虫探针法荧光定量PCR试剂盒
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。