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PARPl和PARP2抑制剂
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:PARPl和PARP2抑制剂
英文名称:PJ34 hydrochloride
产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
PJ34hydrochloride是一种有效的特异的PARPl/2抑制剂,IC50值分别为110nM和86nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:344458-15-7
纯度:98.44%
分子量:331.8
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
4--2- 98%Anti-MR(Mineralocorticoid receptor) 盐皮质激素受体抗体人肿瘤蛋白p63(TP63)酶联免疫吸附测定试剂盒
三聚氟 98%Anti-MRP1 多药耐药相关蛋白1抗体人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,4-二 98%Anti-MRP2 多药耐药相关蛋白2抗体人肿瘤坏死因子β(TNF-β)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,3-二 94%Anti-MRP3 多药耐药相关蛋白3抗体人肿瘤坏死因子配体相关分子-1A(TL1A)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,6-二氟 98%Anti-MRP4/ABCC4 多药耐药相关蛋白4抗体人T-复合蛋白1θ亚(CCT8)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,6-二氟 97%Anti-MRP5/ABCC5 多药耐药相关蛋白5抗体人T-复合蛋白1亚θ样蛋白1(CCT8L1)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,5-二 97%Anti-MrpL28 线粒体核糖体蛋白L28抗体人T-复合蛋白1亚ε(CCT5)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-酚 95%Anti-Alpha-MSH/POMC 促黑激素α抗体人T-复合蛋白1亚ζ(CCT6A)酶联免疫吸附测定试剂盒
1--3-硝胍 98%(~25%water)Anti-MSH-2 错配修复蛋白2抗体人肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)酶联免疫吸附测定试剂盒
氨乙缩二 97%Anti-MSK1 有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-氨噻吩-2-羧酯 99%Anti-Phospho-MSK1 (Ser360) 化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体人肿瘤特异性移植抗原(TSTA)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-三氟酰 98%Anti-Phospho-MSK1 (Ser212) 化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体人肿瘤相关抗原(TAA)酶联免疫吸附测定试剂盒
邻三氟 98%Anti-Phospho-MSK1 (Ser376) 化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体人重去肾上腺素(NEB)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-(三氟) 98%Anti-Phospho-MSK1 (Thr581) 化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体人重组激活因1(RAG-1)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,4,6-三 97%Anti-MST1 蛋白激酶MST抗体人重组激活因2(RAG-2)酶联免疫吸附测定试剂盒
PARPl和PARP2抑制剂巨噬炎症蛋白2( GROβ)抗体Human NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit烟曲霉探针法荧光定量PCR试剂盒
金属硫蛋白抗体Human FUT6(Alpha-(1,3)-fucosyltransferase) ELISA Kit伞枝梨头霉探针法荧光定量PCR试剂盒
磷酸化微管相关蛋白2抗体Human HNRNPK(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K) ELISA Kit马杜拉放线探针法荧光定量PCR试剂盒
内皮MMRN1蛋白抗体Human DEFB1(Beta-defensin 1) ELISA Kit枝顶孢霉探针法荧光定量PCR试剂盒
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗体Human CCBL1(Kynurenine–oxoglutaRate transaminase 1) ELISA Kit马巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒
磷酸化肝生长因子受体(原癌基因)抗体Human AVP(Vasopressin-neurophysin 2-copeptin) ELISA Kit鲁氏不动杆探针法荧光定量PCR试剂盒
磷酸化肝生长因子受体(原癌基因)抗体Human DEFB4A(Beta-defensin 4A) ELISA Kit嗜水气单胞探针法荧光定量PCR试剂盒
磷酸化髓样白血病-1抗体Human IRS2(Insulin receptor substRate 2) ELISA Kit奥叶兹基氏病病探针法荧光定量PCR试剂盒
热门标签:PARPl和PARP2 抑制剂