实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：Akt1/Akt2/Akt3和p70S6K/PKA抑制剂（AT7867）
英文名称：AT7867

产品规格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

发货周期：1～3天

AT7867是一种ATP竞争性的Akt1/Akt2/Akt3和p70S6K/PKA抑制剂，IC50分别为32nM/17nM/47nM和85nM/20nM。

注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！

CAS号：857531-00-1

纯度：99.74%

分子量：337.85

储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

金属镓 99.99999% metals basisAnti-LAG-3/CD223/FITC  荧光素标记淋巴活化因-3抗体IgG鸡补体组分1Q受体1(C1qR1)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化钆 SPAnti-lamin A/FITC  荧光素标记核纤层蛋白A抗体IgG鸡S100钙结合蛋白A13(S100A13 )酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化钆 99.9% metals basisAnti-Laminin Beta1/FITC  荧光素标记层粘连蛋白β1抗体IgG鸡叉头框蛋白P3(FOXP3)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化钆 99.99% metals basisAnti-lamin B/FITC  荧光素标记核纤层蛋白B抗体IgG鸡双调蛋白(AR)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化钆 9.8% metals basis，<100 nm (XRD) Anti-lamin C/FITC  荧光素标记核纤层蛋白C抗体IgG鸡白共同抗原(LCA/CD45)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化锗 SPAnti-Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC  荧光素标记化核纤层蛋白A/C抗体IgG鸡胰岛素样蛋白5(INSL5)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化锗 99.99% metals basis,200目Anti-LAIR-1/CD305/FITC  荧光素标记白相关免疫球蛋白样受体1抗体IgG鸡葡萄糖-6-脱氢酶(G6PD)酶联免疫吸附测定试剂盒

硝钆,六水 AR，99%Anti-LAIR-2/CD306/FITC  荧光素标记白相关免疫球蛋白样受体2抗体IgG鸡热休克蛋白70(HSP-70/HSPA9)酶联免疫吸附测定试剂盒

硝钆,六水 99.99% metals basisAnti-Langerin/CD207/FITC  荧光素标记白分化抗原CD207抗体IgG鸡神经肽Y受体Y5(NPYR5)酶联免疫吸附测定试剂盒

硝钆,六水 99.999% metals basisAnti-LAMA3/Laminin 5 alpha 3/FITC  荧光素标记层粘蛋白α3抗体IgG鸡钙调宁蛋白(CNN1)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化钬 99.99% metals basisAnti-LAP18/stathmin/FITC  荧光素标记白血病相关蛋白18/癌蛋白18抗体IgG鸡转录激活因子6(ATF6)酶联免疫吸附测定试剂盒

铪粒 99.9% metals basis，1-10mmAnti-Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC   荧光素标记化原癌因蛋白18抗体IgG鸡重肽铁蛋白(FTH)酶联免疫吸附测定试剂盒

纳米氧化钬 99.9% metals basis,<100 nm particle size (BET)Anti-Phospho-Stathmin (Ser38)/FITC   荧光素标记化原癌因蛋白18抗体IgG鸡内皮素转化酶1(ECE1)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化铪(IV)  99.99% metals basisAnti-LAT/FITC  荧光素标记T活化连接蛋白抗体IgG鸡β干扰素(IFN-β)酶联免疫吸附测定试剂盒

钬锭 99.9% metals basisAnti-Phospho-LAT (Tyr171) /FITC  荧光素标记化T活化连接蛋白抗体IgG鸡白血病抑制因子(LIF)酶联免疫吸附测定试剂盒
Akt1/Akt2/Akt3和p70S6K/PKA抑制剂（AT7867）肝素结合生长因子(性成纤维生长因子）（多肽片断抗原）Anti-ATG4A Antibody二甲基亚砜Two methyl?sulfoxide

凝血酶原酶 (又称：纤维介素蛋白；凝血素)Anti-ATG4C Antibody香橼（枸橼）Citron?（Gou Yuan）

凋亡调节基因（多肽抗原）Anti-ATN1 Antibody葶苈子（独行菜）Semen Lepidii?（Lepidium）

叉头蛋白3-T转录因子（多肽抗原）Anti-ATN1 Antibody麦白霉素Meleumycin

生长相关蛋白-43（抗原）Anti-ATP12A Antibody威灵仙（绵团铁线莲）Clematis?（Clematis?woolly?group）

胃泌素（抗原）Anti-ATP2A2 Antibody瓜蒌（栝楼）Trichosanthes?（Trichosanthes kirilowii Maxim

α－甲基酰基辅酶A消旋酶抗原Anti-ATP1A2 Antibody卡那霉素Kanamycin

胶质纤维酸性蛋白（抗原）Anti-ATP1B3 Antibody印度獐芽菜India?Swertia japonica