实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：泛class IPI3K抑制剂（NVP-BKM120 Hydrochloride）
英文名称：NVP-BKM120 Hydrochloride

产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

发货周期：1～3天

NVP-BKM120Hydrochloride是一种泛class IPI3K抑制剂，作用于p110α/p110β/p110δ/p110γ，IC50分别为52nM/166nM/116nM/262nM。

注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！

CAS号：1312445-63-8

别名：BKM120 hydrochloride

纯度：98.01%

分子量：446.85

储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

硝锂 AR,99%Anti-Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) /FITC  荧光素标记化核糖体蛋白S6激酶家族RSK3抗体IgG鸡弹性蛋白酶3B(ELA3B)酶联免疫吸附测定试剂盒  

硝锂 CP,98%Anti-Phospho-p90RSK (Ser380) /FITC  荧光素标记化丝氨/苏氨激酶p90RSK蛋白抗体IgG鸡核RNA输出因子1(NXF1)酶联免疫吸附测定试剂盒

硝锂 99.9% metals basisAnti-Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363)/FITC  荧光素标记化丝氨/苏氨激酶p90RSK蛋白抗体IgG鸡蛋白质二硫键异构酶(PDI)酶联免疫吸附测定试剂盒

锂  99%Anti-Phospho-p90RSK (Thr573)/FITC  荧光素标记化丝氨/苏氨激酶p90RSK蛋白抗体IgG鸡神经肽Y受体Y2(NPYR2)酶联免疫吸附测定试剂盒

锂  99.99% metals basisAnti-LDH/FITC  荧光素标记抗脱氢酶抗体IgG鸡胰蛋白酶(TRY)酶联免疫吸附测定试剂盒

碳锂 AR,99.5%Anti-LDL/FITC  荧光素标记低密度脂蛋白抗体IgG鸡多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)酶联免疫吸附测定试剂盒

碳锂  ACS, ≥99.0%Anti-LDL-R/FITC  荧光素标记低密度脂蛋白受体抗体IgG鸡早老素2(PS2)酶联免疫吸附测定试剂盒

碳锂 SPAnti-Leptin/FITC  荧光素标记瘦素抗体IgG鸡胞浆蛋白1(STMN1)酶联免疫吸附测定试剂盒

碳锂 99.99% metals basisAnti-Leptin/FITC  荧光素FITC标记瘦素抗体IgG鸡血管生成素4(ANGPT4)酶联免疫吸附测定试剂盒  

碳锂 5NAnti-Leptin receptor/FITC  荧光素标记瘦素受体抗体IgG鸡凋亡相关因子配体(FASL/TNFSF6)酶联免疫吸附测定试剂盒

氟化镧 99.99% metals basisAnti-Leptin receptor(long) /FITC  荧光素标记瘦素受体抗体（长）IgG鸡C型凝集素结构域家族2成员C(CLEC2C)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化镧 SPAnti-Leptin receptor(long)/FITC  荧光素标记瘦素受体抗体（长）IgG鸡骨骼肌特异性受体酪氨激酶(MUSK)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化镧 99.99% metals basisAnti-LFABP/FABP-1 /FITC  荧光素标记肝脏型脂肪结合蛋白抗体IgG鸡肿瘤蛋白p63(TP63)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化镧 99.999% metals basisAnti-LFABP/FABP-2 /FITC  荧光素标记肝脏型脂肪结合蛋白抗体IgG鸡丝氨蛋白酶1(PRSS1)酶联免疫吸附测定试剂盒

氧化镧 99.99% metals basis,50nmAnti-Lgr5/GPR49/FITC  荧光素标记肠上皮干蛋白抗体IgG鸡无孢蛋白(ASPN)酶联免疫吸附测定试剂盒
泛class IPI3K抑制剂（NVP-BKM120 Hydrochloride）葡萄糖转运蛋白2（抗原）Anti-ATP6V1C2 Antibody紫河车Dried human placenta

心钠肽（心钠素）抗原Anti-ATP6V1H Antibody青果Chinese olive

GDNF家族受体α-4（抗原）Anti-ATP6V1B1 Antibody万丈深（绿茎还阳参）The bottomless deep?（green stem?Crepis c

生长释放（因子）（抗原）Anti-ATP5PB Antibody榧子TorrFS-a

血管位蛋白样1/血管生成素样蛋白-1抗原Anti-ATP5MPL Antibody绿茶（茶叶）Green tea?（tea）

葡萄糖转运蛋白4（抗原）Anti-ATP6V1H Antibody羊开口Sheep openings

胃泌素抑制肽（抗原）Anti-ATPAF2 Antibody谷精草Eriocaulon buergerianum

血管位蛋白样2/血管生成素样蛋白-2（多肽）Anti-ATR Antibody扭肚藤Torsion?Jasmine