实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：MPS1小分子抑制剂(NMS-P715)
英文名称：NMS-P715

产品规格：2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

发货周期：1～3天

NMS-P715是个高选择性、ATP竞争性的MPS1小分子抑制剂，IC50值为8nM，能选择性抑制癌细胞增生，对正常细胞几乎无影响。

注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！

CAS号：1202055-32-0

纯度：99.46%

分子量：676.73

储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

聚生壳 2,5-二氯-3-溴吡啶心肌特异性肌钙蛋白T检测试剂盒

迪吉氏黄杆 3,5-二氟-4-苯心肌营养素1检测试剂盒

台湾芽孢杆 噻吩-3-乙心钠素检测试剂盒

病研所芽孢杆 氯化铕(II)心型脂肪酸结合蛋白3检测试剂盒

耐冷类诺卡氏 2-正丁基乙酰乙酸乙酯心型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒

红细属 苯基三氟酸锌-α2糖蛋白检测试剂盒

球孢白僵 高氯酸锰六水合物锌指蛋白36检测试剂盒

 酪丁酸梭DNA 2-氯-5-氯磺酰基苯甲酸锌转运体8检测试剂盒

橄榄产色链霉 2,3-二溴-5-氯吡啶新饱食分子蛋白1检测试剂盒

简青霉 2-氟-4-苯新喋呤检测试剂盒

Streptococcus sanguinis 3-氯-4-氟苯甲酸乙酯新蝶呤检测试剂盒

异常威克汉姆酵母 4-溴乙酸信号传导子及转录激活子1检测试剂盒

山东糖多孢 邻三氟甲氧基苯乙信号传导子及转录激活子3检测试剂盒

水稻肠杆 碳酸镁(菱镁矿)信号传导子及转录激活子6检测试剂盒

拟康氏木霉 三叔丁基膦溶液信号感应增殖相关蛋白1检测试剂盒
MPS1小分子抑制剂(NMS-P715)荧光素Cy3标记猪胰岛素蛋白Anti-JDP2 Antibody小鼠蛋白酶激活受体-2（PAR2）elisa定量检测试剂盒

(亲和纯化) 小鼠IgGAnti-JTB Antibody小鼠鸟氨酸氨基甲酰转移酶（OCT）elisa定量检测试剂盒

小鼠IgM (亲和纯化)Anti-JUNB Antibody小鼠相关血浆蛋白A（PAPP-A）elisa定量检测试剂盒

(亲和纯化) 猴IgMAnti-JUN Antibody小鼠核RNA 输出因子1（NXF1）elisa定量检测试剂盒

Alexa Fluor 350标记小鼠IgG(流式同型对照)Anti-KAT2A Antibody小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶O型受体（PTPRO）elisa定量检测试剂盒

Alexa Fluor 555标记小鼠IgG(流式同型对照)Anti-KANK2 Antibody小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶（M2-PK）elisa定量检测试剂盒

兔抗小鼠IgA抗血清Anti-JUND Antibody小鼠环指蛋白4（RNF4）elisa定量检测试剂盒

Alexa Fluor 647标记小鼠IgG(流式同型对照)Anti-KAT2B Antibody小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）elisa定量检测试剂盒