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中文名称：A2AR抑制剂(CPI-444)
英文名称：CPI-444

产品规格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

发货周期：1～3天

CPI-444是一种有效的选择性A2A受体(A2AR)抑制剂，诱导抗肿瘤反应。

注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！

CAS号：1202402-40-1

别名：V81444

纯度：99.60%

分子量：407.43

储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

多主葡萄壳 2,5-二溴-3-甲基噻吩胰蛋白酶原Ⅱ检测试剂盒

铜绿假单胞 福多斯坦胰蛋白酶原激活肽检测试剂盒

孟氏假单胞 香草乙胰岛素检测试剂盒

青霉 苯酰甲硝唑胰岛素降解酶检测试剂盒

刘志恒氏 4-溴乙酰乙酸乙酯胰岛素受体底物1检测试剂盒

嗜热链球 1-(2,3,4－－氧苯甲基)哌胰岛素受体底物2检测试剂盒

地衣芽孢杆 盐酸阿比朵尔水合物胰岛素样生长因子1检测试剂盒

淤泥金黄杆 2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶胰岛素样生长因子1受体检测试剂盒

葡萄座腔属 3-氯-2-羟基基烯酸酯胰岛素样生长因子2检测试剂盒

绿色木霉 2,2＇-二羟基-4,4＇-二甲氧基二苯甲酮胰岛素样生长因子2受体检测试剂盒

无色壳囊孢 4,7-二溴-2-(9-十七烷基)-2H-苯并[1,2,3]三氮唑胰岛素样生长因子3检测试剂盒

贝伦格葡萄座腔梨生化型 邻苯二甲酸二烯酯胰岛素样生长因子4检测试剂盒

枯草芽孢杆 氢氧化铁胰岛素样生长因子-Ⅰ受体检测试剂盒

类干酪乳杆 4-氯-3-硝基吡啶胰岛素样生长因子结合蛋白-1检测试剂盒

毛栓孔 三氟酮酸乙酯胰岛素样生长因子结合蛋白-2检测试剂盒
A2AR抑制剂(CPI-444)罗丹明标记人IgAAnti-KDELR3 Antibody小鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α（pIκBα）elisa定量检测试剂盒

罗丹明标记猴IgGAnti-KDR Antibody小鼠蛋白二硫键异构酶A3（PDIA3）elisa定量检测试剂盒

罗丹明标记猴IgMAnti-KDM4B Antibody小鼠唾液酸结合球蛋白样凝集素12（SIGLEC12）elisa定量检测试剂盒

罗丹明标记小鼠IgMAnti-KEL Antibody小鼠核孔蛋白155（NUP155）elisa定量检测试剂盒

罗丹明标记猪IgGAnti-KDR Antibody小鼠核因子κB抑制蛋白α（IκBα）elisa定量检测试剂盒

罗丹明标记水貂IgGAnti-KDR Antibody小鼠过氧化物酶膜蛋白3（PMP3）elisa定量检测试剂盒

罗丹明标记兔IgMAnti-KIF13B Antibody小鼠纤溶酶原激活物抑制因子2（PAI-2）elisa定量检测试剂盒

罗丹明标记大鼠IgMAnti-KIAA0100 Antibody小鼠血小板白C激酶底物同源性样域家族A成员2（PHLDA2）elisa定量检测试剂盒
注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。