实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：mTOR抑制剂(XL388)
英文名称：XL388

产品规格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

发货周期：1～3天

XL388是ATP竞争性mTOR选择性抑制剂，IC50为9.9nM，相对于与PI3K相关的激酶有1000倍的选择性。

注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！

CAS号：1251156-08-7

纯度：98.76%

分子量：455.5

储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项

1. 微量试剂取用请离心集液。

2. 避光保存及使用。

3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

锈赤蜡黄链霉 1-苄氧羰基-3-羟基氮杂环丁烷喋呤抗体检测试剂盒

慢生根瘤 2,4-二溴吡啶-3-甲胃动蛋白2抗体检测试剂盒

酿酒酵母 3,4-双(二氟甲氧基)苯甲Ⅱ型胶原α1检测试剂盒

泡盛曲霉 6-溴-7-氟喹啉无翅型MMTV整合位点家族成员1检测试剂盒

马沙门氏 1-Boc-2-T因子检测试剂盒

白黄马赛 1-二茂铁基乙尿肌酐检测试剂盒

黄曲霉 2-氯-4-甲氧基苯青霉素检测试剂盒

芽孢杆 N,N-双(4-磺丁基)-3-链霉素检测试剂盒

布鲁塞尔德克酵母 2-基-4-氟苯甲酸甲酯庆大霉素检测试剂盒

食有机物深海芽孢杆 6-氯-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮相关抗原11A检测试剂盒

卡门柏青霉 3-氟-4-溴溴苄肝吸虫检测试剂盒

Methylibium 基二茂铁全反钴素II型检测试剂盒

酿酒酵母 H-89 肝吸虫IgM抗体检测试剂盒

毛栓孔 1-甲基-1H-吡唑-4-肝吸虫IgG抗体检测试剂盒

类芽孢杆属 1-N-苄氧羰基哌-2-甲酸甲酯抗磷脂酶A2受体IgG抗体检测试剂盒
mTOR抑制剂(XL388)大鼠Ⅰ型胶原N端肽Anti-MRPL14 Antibody人己糖激酶2（HK2）elisa定量检测试剂盒

人白三烯D4Anti-MRPL13 Antibody人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3（EAR3）elisa定量检测试剂盒

小鼠抗核抗体Anti-MRPL15 Antibody人死亡相关蛋白6（DAP6）elisa定量检测试剂盒

兔抑瘤素MAnti-MRPL18 Antibody人纤溶酶原（Plg）elisa定量检测试剂盒

小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白Anti-MRPL21 Antibody人胸腺五肽（TP5）elisa定量检测试剂盒

大鼠解整合素样金属蛋白酶9Anti-MRPL20 Antibody人视黄酸诱导基因/RIG-1样受体（RLR）elisa定量检测试剂盒

人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白Anti-MRPL24 Antibody人补体因子H相关蛋白3（CFHR3）elisa定量检测试剂盒

植物血凝素Anti-MRPL22 Antibody人胃动蛋白1（GKN1）elisa定量检测试剂盒