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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

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酵母基因组DNA大量提取试剂盒

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品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/5/18 19:15:14更新时间:2024/8/21 0:02:37

产品摘要:酵母基因组DNA大量提取试剂盒公司正在热销的产品:血小板内皮黏附分子1抗体Anti-SSTR3 生长抑素受体3抗体CD34抗体Anti-SSTR4 生长抑素受体4抗体CD36抗体Anti-SSTR5 生长抑素受体5抗体凋亡加强结构域蛋白6抗体Anti-StAR/StARD1 促黄体诱导蛋白抗体

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详细内容

下列是产品的订购信息!
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产品规格
货号
酵母基因组DNA大量提取试剂盒
Yeast DNA Massive Extraction Kit
10次
GOY-F9742

产品说明书:
本试剂盒用于快速的从酵母中大量提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下, 酵母细胞被裂解释放出基因组DNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
试剂盒组份:
酵母裂解液——————100ml×2
蛋白沉淀液——————70ml
DNA溶解液 ——————30ml
产品特点:
1.不需要使用有毒的、等试剂。
2.快速,简捷,整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定,产量高(比离心柱型的产量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。
操作步骤:
1. 吸取60ml-70ml 酵母培养物到一个100ml 离心管;2,500 x g 离心2 分钟,尽可能弃上清,必要时候可以用枪吸去。
2. 高速涡旋振荡,打散重悬酵母细胞团。
3. 加入20 ml 酵母裂解液,涡旋振荡混匀,或者用1 毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要,必须充分分散重悬。
4. 将裂解物放置在70℃水浴15-30 分钟。
如果产量低,可以适当提高水浴温度和延长水浴时间,中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5. 冰上至少5 分钟使回复到室温。
6. 在回复到室温的裂解物内加入6.8 ml 蛋白沉淀液后,在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀25 。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5 分钟。
7. 2,500 x g(可根据需要调整加大离心力)离心5 分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀,也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
8. 小心缓慢吸取上清到一个新的100ml 离心管中,不要吸到沉淀。吸取上清时,注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中,可再次离心2 分钟后取上清。
9. 加入等体积的室温异丙醇,颠倒30 次混匀或者直到出现絮状DNA 沉淀(或者白色浑浊沉淀)。
10. 2,500 x g 离心5 分钟(可根据需要调整加大离心力),在管底可以见到白色的DNA沉淀块,倒弃上清。
11. 加入20ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗DNA 沉淀,2,500 x g 离心2 分钟, 倒去上清(注意不要把DNA 沉淀倒掉了),倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇,还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟。注意不要干燥过头,否则DNA其难溶;也不能残留太多乙醇,否则乙醇可能抑制下游如酶切反应。
12. 加入1-3ml DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀,轻弹管壁混匀,可以放置在65℃温育30-60 分钟(不要过一小时),也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
13. 加入0.5-1ml RNase A(10mg/ml),颠倒混匀,37℃温育30-60 分钟去除残留RNA。该步骤主要作用为去除残留的RNA,如果残留RNA多,可以适当延长时间或者增加RNase A 用量。如果残留RNA 不影响实验,可略去该步骤。如果残留的RNA酶可能影响实验,也可以用等体积酚/抽提去除,然后用标准的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。
储存条件:室温,有效期12个月。
本制品别名:酵母DNA大量提取试剂盒|大龄酵母
 
产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在-70℃温度以下进行。
心肌肌钙蛋白T(TNNT2)酶联免疫试剂盒Fmoc-L-谷氨酰 BR对三联苯 分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(HPLC)芘(标准品)
心肌肌钙蛋白I(TNNI3)酶联免疫试剂盒Fmoc-D-氨酸  BR对三联苯 ≥99.5%苯乙烯(标准品)
心肌肌动蛋白α1(ACTC1)酶联免疫试剂盒Fmoc-D-天冬酰 BR锰粉 99.99% metals basis,粉末苯乙烯标准溶液(1000μg/ml)
心肌钙黏蛋白(CDHH)酶联免疫试剂盒Fmoc-L-谷氨酸γ苄脂 BR对苯醌 99%(-)-盐酸东莨菪碱(标准品)
斜方蛋白1(RHOM1)酶联免疫试剂盒Fmoc-D-亮氨酸 BRN-苯基-2-萘 98%硫标准溶液(1000ug/ml,基体:1%HCl)
小异二聚体伴侣(SHP)酶联免疫试剂盒Fmoc-D-脯氨酸 BR二乙二一己 96%水质二氧化硫(甲法)(水剂)标样(溶剂:0.4-0.6mg/L,分析标准品)
小亚基钙蛋白酶1(CAPNS1)酶联免疫试剂盒Fmoc-D-缬氨酸 98%2-异氧基乙 99%十四烷(标准品)
小蛋白γ(PARVγ)酶联免疫试剂盒Fmoc-D-丝氨酸 BR十一烷 standard for GC, ≥99.5% (GC)三氯乙烯标准溶液(1000μg/ml,溶剂:甲)
小蛋白β(PARVβ)酶联免疫试剂盒甘氨酸-L-亮氨酸 98%十一烷 分析标准品,≥99.8% (GC)1,2,3,4-四氢萘(THN)(标准品)
小蛋白α(PARVα)酶联免疫试剂盒DL-谷氨酸 98%十一烷 98%2,3,4,6-四氯酚(标准品)
小脑肽4(CBLN4)酶联免疫试剂盒L-谷氨酸双苄酯对甲苯磺酸盐 98%十一烷 99%四氯乙烯标准溶液(1000μg/ml,溶剂:甲)
小脑肽3(CBLN3)酶联免疫试剂盒D-酸  99%十一烷 ≥98%磷酸酯(标准品)
小脑肽2(CBLN2)酶联免疫试剂盒L-高精氨酸盐酸盐 98%2,2-二甲氧基烷 99%磷酸三辛酯(标准品)
小脑肽1(CBLN1)酶联免疫试剂盒DL-高丝氨酸 99%抗坏血酸 AR,99.7%2,3,5-三酚(标准品)
小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)酶联免疫试剂盒L-高丝氨酸 98%抗坏血酸 USP302,4,5-三氯苯酚(标准品)
小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫试剂盒Fmoc-L-羟脯氨酸 98%硅钼粉 99.8%2,4,5-三氯苯(标准品)
酵母基因组DNA大量提取试剂盒1'-Acetonaphthone
941-98-0
中文名: 1'-萘乙酮
别 名:
分子式:C12H10O
性状:Powder
纯度:98.0%
Exemestane
107868-30-4
中文名: 依西美坦
别 名:
分子式:C20H24O2
性状:Powder
纯度:98.0%
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
 

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