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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

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植物基因组DNA快速提取试剂盒(CTAB法)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/5/18 19:15:58更新时间:2024/8/21 0:02:37

产品摘要:植物基因组DNA快速提取试剂盒(CTAB法)正在出售的产品:猪瘟病抗体Anti-phospho-STAT5a(Tyr694) 磷酸化信号转导和转录活因子5a抗体猪瘟病抗体Anti-phospho-STAT6(Tyr641) 磷酸化信号转导和转录活因子6

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详细内容

实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。 
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性:
中文名称:植物基因组DNA快速提取试剂盒(CTAB法)
英文名称:Plant genomic DNA Extraction Kit(CTAB)
产品规格:50次|100次|200次
产品货号:GOY-F9745
本试剂盒采用改进的经典CTAB植物DNA抽提液(添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份)迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质(根据需要,上清中还加入异丙醇离心沉淀基因组DNA,进一步去除其它各种杂质),然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖、多酚和细胞代谢物、蛋白等杂质去除,后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(100次):
裂解液PL————————80 ml
结合液PQ————————30ml
抑制物去除液IR—————50ml
漂洗液WB————————25ml
洗脱缓冲液EB——————15ml
吸附柱AC————————100个
收集管(2ml)—————100个
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。
4.数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30 kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 开始实验将需要的水浴先预热到65℃备用。
3. 需要自备/异戊醇(体积比24:1混合)、无水乙醇和β-巯基乙醇。
4. 结合液PQ 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 不同来源的植物组织材料中提取DNA 的量会有差异,一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
7. 本试剂盒是按照标准提取过程配置各溶液体积,如果样品DNA含量低或者产量低,需要扩大提取量,还需要另外购买溶液。
储存条件:室温,有效期12个月。
本制品别名:CTAB植物
 
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
线粒体转录因子A(TFAM)酶联免疫试剂盒L-脯氨 97%聚乙二 average Mn 1500乙缩(Standard for GC,>99%(GC))
线粒体乙脱氢酶(ALDM)酶联免疫试剂盒D-苯甘氨酸甲酯盐酸盐 96%聚乙二 average Mn 2000乙酰酮(Standard for GC,≥99.6%(GC))
线粒体外膜转位酶70A(TOMM70A)酶联免疫试剂盒L-苯甘氨酸甲酯盐酸盐 98%聚乙二 average Mn 4000烯酸丁酯(BA)(Standard for GC,≥99.5%(GC))
线粒体铁蛋白(MFRN)酶联免疫试剂盒L-高脯氨酸 98%聚乙二 average Mn 6000仲丁基苯(Standard for GC,>99.0%(GC))
线粒体铁蛋白(FTMT)酶联免疫试剂盒L-苯氨酸甲酯盐酸盐 98%聚乙二 average Mn 800正丁(standard for GC,>99.5%(GC))
线粒体融合素2(MFN2)酶联免疫试剂盒L-苯氨酸乙酯盐酸盐 98%聚乙二 average Mn 600正戊(Standard for GC,>99.5%(GC))
线粒体融合素1(MFN1)酶联免疫试剂盒D-脯氨酸 99%聚乙二 average Mn 300叔丁基苯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))
线粒体解偶联蛋白2(UCP2)酶联免疫试剂盒N-苯基甘氨酸 97%聚乙二 average Mn 20000溴苯(Standard for GC,>99.5%(GC))
线粒体解偶联蛋白1(UCP1)酶联免疫试剂盒D-苯甘氨 99%聚乙二 average Mn 10000丁酸丁酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))
线粒体肌酸激酶1B(CKMT1B)酶联免疫试剂盒D-脯氨 98%聚乙二 average Mn 80001,4-丁炔二(Standard for GC, ≥99.5% (GC))
线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)酶联免疫试剂盒L-苯甘氨酸乙酯盐酸盐 98%聚乙二 average Mn 400叔丁(standard for GC,≥99.5%(GC))
线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)酶联免疫试剂盒L-苯氨酸苄酯对甲苯磺酸盐 98%壬基酚聚氧乙烯 Type NP-72,3-丁二酮(standard for GC,≥99.0%(GC))
线粒体超氧化物歧化酶(SOD2)酶联免疫试剂盒D-丝氨酸甲酯盐酸盐 98%壬基酚聚氧乙烯 Type NP-9癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC))
线粒体GTP酶1(MTG1)酶联免疫试剂盒肌氨酸 99%壬基酚聚氧乙烯 Type NP-10溴代正丁烷(Standard for GC,>99.5%(GC))
线粒体-5'-核苷酸酶(NT5M)酶联免疫试剂盒L-丝氨酸乙酯盐酸盐 99%聚乙二基壬基 90% active ingredients basis正丁硫(standard for GC,≥99%(GC))
衔接因子相关蛋白复合体2μ1(AP2μ1)酶联免疫试剂盒D-丝氨酸 98.5%聚乙二基壬基 90% active ingredients basis乙酸仲丁酯(standard for GC, ≥99.5% (GC))
植物基因组DNA快速提取试剂盒(CTAB法)Methoxydie
2322-77-2
中文名: 沃氏物
别 名:
分子式:C20H28O2
性状:Powder
纯度:98.0%
Methasterone
3381-88-2
中文名: 甲基屈他雄酮
别 名:
分子式:C21H34O2
性状:Powder
纯度:98.0%
 

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