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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

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土壤基因组提取试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/5/18 19:19:12更新时间:2024/8/21 0:02:37

产品摘要:土壤基因组提取试剂盒正在出售的产品:表面趋化因子受体2A抗体Anti-phospho-Tau protein (Ser396) 磷酸化微管相关蛋白抗体表面趋化因子受体2B抗体Anti-phospho-Tau protein (Ser422) 磷酸化微管

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详细内容

产品属性:
中文名称:土壤基因组提取试剂盒
英文名称:Soil Genomic DNA Extraction Kit
产品规格:50次
产品货号:GOY-F9757
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的干燥土壤、湿泥、淤泥及海河沉淀物中提取总DNA。本产品使用安全方便,单个样品操作一般可在40分钟内完成。使用本品每克土壤可获得5μg以上的DNA,片段长度主要在20-30 kb之间。本试剂盒采用独特的溶液能够有效去除杂质和腐殖酸,通过优化的缓冲系统使裂解液中的DNA高效结合到吸附柱上,土壤中残留的杂质、PCR和酶反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤有效去除,后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
自备试剂:无水乙醇,70%乙醇。
实验准备及重要注意事项:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA段较小且提取量也下降。
2、第yi次使用应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PR、GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用请检查Buffer SL和Buffer GLS是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer SL和Buffer GLS于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取0.1 g-0.3 g土壤样本,置于离心管(自备)中,加入1ml Buffer SW,涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来)。12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉上清。
2、加入750μl的70%乙醇,涡旋振荡1分钟(须将管底的土壤震起来),12000rpm离心1分钟,倒掉上清,用移液器将余液吸尽。
3、向沉淀中加入500μl Buffer SL,涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来),65℃水浴20分钟(可每隔5分钟涡旋振荡5),12000rpm离心3分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
4、向上清液中加等体积Buffer GLS,颠倒混匀15-25次,冰上放置5分钟。12000rpm离心5分钟。
注意:冰上放置后液体可能会凝结,属正常现象。
5、将步骤4中所得上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:若一次不能加完溶液,可分多次转入。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer PR(使用检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水,室温放置 2-5分钟, 12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
储存条件:室温(15~30℃)。
 
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。 
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
微管蛋白β3(TUBβ3)酶联免疫试剂盒3-酸 97%桂酸苯乙酯 96%氟氯菊酯标准溶液(100μg/ml,u=4%,基体:正己烷)
微管蛋白β1(TUBβ1)酶联免疫试剂盒7-硝基吲哚 99%桂酸酯 98%氟氯菊酯标准溶液(10μg/ml,u=5%,基体:正己烷)
微管蛋白β(TUBβ)酶联免疫试剂盒4-正戊基苯酸 97%苯乙双胍盐酸盐 97%氯菊酯(标准品)
微管蛋白α8(TUBα8)酶联免疫试剂盒6-硝基吲哚啉 98%青霉素 98%氯菊酯(分析标准品,99.7%)
网状蛋白4受体(RTN4R)酶联免疫试剂盒去甲劳丹碱盐酸盐 98%间三氟甲基肉桂酰氯 95%氯菊酯标准溶液(100μg/ml,u=3%)
网状蛋白4(RTN4)酶联免疫试剂盒吡啶-3-酸 97%4-三氟甲基肉桂酸 98%氯菊酯标准溶液(10μg/ml,u=6%)
网状蛋白3(RTN3)酶联免疫试剂盒3-甲酸 98%曲安缩松 99%四氯间苯二(98%)
网状蛋白2(RTN2)酶联免疫试剂盒3-氧基苯基酸98%酸素 98%百菌清标准溶液(100μg/ml,u=4% ,,溶剂:石油)
网状蛋白1(RTN1)酶联免疫试剂盒正酸 98%枸橼酸三苯氧 99%灭蝇标准溶液(10μg/ml,u=2%)
网格蛋白交互子1(CLINT1)酶联免疫试剂盒3-喹啉酸频哪酯 95%2-硝基肉桂酸 98%霜脲(标准品)
网钙蛋白3(RCN3)酶联免疫试剂盒2,3,4-三氟苯酸 96%对硝基肉桂 98%顺式氯菊酯(标准品)
网钙蛋白2(RCN2)酶联免疫试剂盒4-(三氟甲基)苯酸 98%睾酮-素 98%四螨(标准品)
网钙蛋白1(RCN1)酶联免疫试剂盒4-(叔丁氧基羰基)苯酸 95%睾酮-素 98%,用于培养四螨标准溶液(100μg/ml,u=4%)
网蛋白(PLEC)酶联免疫试剂盒4-(叔丁基二甲硅氧基)苯酸 97%对溴肉桂 95%四螨标准溶液(10μg/ml,u=6%)
晚期糖基化终末产物受体(AGER)酶联免疫试剂盒4-(2-四氢吡喃氧基)苯酸 96%间三氟甲基肉桂酰氯 97%萎锈灵(标准品)
晚期糖基化终末产物(AGE)酶联免疫试剂盒4-(硅基)苯酸 97%2-(三氟甲基)肉桂酸 98%灭幼脲标准溶液(100μg/ml,u=4%,基质:酮)
土壤基因组提取试剂盒Oxandrolone
53-39-4
中文名: 氧甲氢龙
别 名:
分子式:C19H30O3
性状:Powder
纯度:98.0%
Mesterolone
1424-00-6
中文名: 甲氢睾酮
别 名:
分子式:C20H32O2
性状:Powder
纯度:98.0%

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