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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

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一步法荧光定量RT-PCR试剂盒(SYBR Green)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/5/28 13:42:42更新时间:2024/8/21 0:03:05

产品摘要:一步法荧光定量RT-PCR试剂盒(SYBR Green)正在出售的产品:整合素α4抗体Rabbit Anti-Guinea IgM Whole serum 兔抗豚鼠IgM抗血清白介素15抗体Rabbit Anti-horse IgG Whole seru

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详细内容

操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性:
中文名称:一步法荧光定量RT-PCR试剂盒(SYBR Green)
英文名称:ByFast SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit
产品规格:100T|500T
产品货号:GOY-F10694
本试剂盒是一种基于SYBR Green染料用于一步法反转录实时荧光定量PCR,即qRT-PCR或real-time RT-PCR的高品质预混液,主要用于RNA的特异性高灵敏度定量检测。
本试剂盒以提取的RNA为模版,使用qPCR引物在同一反应管内连续进行反转录和荧光定量PCR,操作简单快速,大限度地减少人为误差,有效降低污染风险,节约PCR实验的操作时间,检测通量大。
本试剂盒整合了高效的BalbRT M-MuLV Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor和优异的抗体结合型热启动ByFast Taq DNA Polymerase,并优化了缓冲体系,反转录性能优、检测灵敏度高、扩增特异性、反应稳定性好,非常适合于內源低丰度RNA、外源病毒RNA等微量RNA的检测。
本试剂盒使用SYBR Green I作为染料。SYBR Green I是一种结合于双链DNA(double-strand DNA,dsDNA)双螺旋小沟区域的绿色荧光染料。SYBR Green I在游离状态下的荧光比较微弱,一旦与双链DNA结合后,其荧光会大大增。这样通过检测荧光弱就可以定量检测PCR过程中扩增产生的双链DNA的数量。
本试剂盒使用的ByFast Taq DNA Polymerase是一种与抗体结合的高品质热启动酶,能够实现便捷高效的热启动。ByFast Taq DNA Polymerase中的Taq酶与抗Taq酶的单克隆抗体相互结合,从而抑制了Taq酶的DNA聚合酶活性,这样可以有效避免在低温条件下由引物和模板DNA非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。在PCR反应的预变性步骤中抗体会被加热失活,这样可以确保仅在预变性后才会把Taq酶的活性释放出来,预变性之不会发生DNA聚合反应,从而大大提高了PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。
保存:-20℃避光,尽量避免反复冻融,有效期2年。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。 
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
细胞血管紧张Ⅰ转化2(ACE2)活性荧光定量检测试剂盒20次伏(体)盐帕罗
组织血管紧张Ⅰ转化2(ACE2)活性荧光定量检测试剂盒20次溶菌西洛他唑
血血管紧张Ⅰ转化2(ACE2)活性荧光定量检测试剂盒20次美蓝(亚蓝)L-那格列奈
体血管紧张Ⅰ转化2(ACE2)活性荧光定量检测试剂盒20次水杨齐多夫定杂质B
细胞血管紧张Ⅰ转化2(ACE2)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒20次MiddleBrook 7H10 琼脂伐他汀钠
组织血管紧张Ⅰ转化2(ACE2)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒20次MiddleBrook 7H11 琼脂萘磺右氧芬
血血管紧张Ⅰ转化2(ACE2)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒20次气单胞菌鉴别琼脂 沙苑子LAMP鉴定试剂盒
体血管紧张Ⅰ转化2(ACE2)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒20次精氨肉汤蜈蚣探针法PCR鉴定试剂盒
细胞人类巨细胞毒(HCMV PROTEASE)活性荧光淬灭法20次曲霉琼脂础(AFPA)人激肽释放6(KLK 6)Elisa测定试剂盒
定量检测试剂盒假单胞分离琼脂猪苓染料法PCR鉴定试剂盒
组织人类巨细胞毒(HCMV PROTEASE)活性荧光淬灭法20次假单胞分离肉汤人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)Elisa测定试剂盒
定量检测试剂盒肌测定培养小鼠血管活性肠肽(VIP)Elisa测定试剂盒
血人类巨细胞毒(HCMV PROTEASE)活性荧光淬灭法20次溴紫葡萄糖肉汤猪转化生长因子β2(TGF-β2)Elisa测定试剂盒
定量检测试剂盒性肉汤猪黑色瘤转移表面黏附分子(MMSAM)Elisa测定试剂盒
体人类巨细胞毒(HCMV PROTEASE)活性荧光淬灭法20次烟测定培养猪髓磷脂性(MBP)Elisa测定试剂盒
一步法荧光定量RT-PCR试剂盒(SYBR Green)Lycernuic acid A
53755-77-4
中文名:
别 名:
分子式:C30H48O4
性状:Powder
纯度:96.5%
Taraxerol
127-22-0
中文名: 蒲公英赛醇
别 名: 蒲公英萜醇
分子式:C30H50O
性状:Powder
纯度:98.5%
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。

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