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pET-28a(+)载体

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品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/6/1 21:04:20更新时间:2024/8/21 0:03:05

产品摘要:pET-28a(+)载体正在出售的产品:同源盒蛋白MEIS3抗体Nm23(NDP Kinase A,NDPKA) 肿瘤转移抑制基因抗原颗粒分化蛋白抗体Nm23-H1 (nucleoside dIPhosphatase kinase A) 肿瘤抑制基因抗

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详细内容

实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。 
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性:
中文名称:pET-28a(+)载体
英文名称:
产品规格:20ug
产品货号:GOY-F10925
pET-28a(+)是一种常用的融合蛋白类型原核高效表达载体,含有抗卡那基因。表达由宿主细 胞提供的 T7 RNA 聚合酶诱导。
宿主菌:建议克隆用 E.coli DH5α 或 0 做受体菌;表达用 E.coli BL21(DE3)或 BL21(DE3)pLysS 做受体菌。
储存条件 :-20℃
 
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
红色荧光细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒500次L-甘-酪二肽
磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B)细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒100次小鼠多巴(DA)ELISA试剂盒,
考马斯亮蓝细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒500次小鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒,
XTT比色法细胞繁殖测定试剂盒500次小鼠性休克综合征素1(TSST-1)ELISA试剂盒,
CCK-1(水溶性四氮唑-1 )比色法细胞繁殖测定试剂盒500次小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒,
CCK-8(水溶性四氮唑-8) 比色法细胞繁殖测定试剂盒500次小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒,
酚藏花红(PHENOSAFRANINE)植物细胞繁殖测定试剂盒100次兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒,
二荧光素(Fluorescein diacetate)植物细胞繁殖测定试剂盒100次兔子巨噬炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒,
伊文思蓝(EVANS BLUE)植物细胞繁殖测定试剂盒100次兔子质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒,
虫卵细胞活力和死亡荧光定量检测试剂盒50次活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒--动物,人
虫卵细胞活力和死亡体外裂卵(in vitro excystation)定量检测试剂盒20次Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒--动物,人
虫卵细胞活力和死亡细胞流式定量检测试剂盒20次8异列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒--动物,人
细胞筛选试剂题皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒--动物,人
名称规格L-正缬氨
染色体核型吉姆莎染色分析试剂盒100次小鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒,
AEG-1  AEG-1抗体戊丁酯 ≥98.0 %
ADFP  脂肪组织分化相关蛋白抗体3-溴叔丁二硅  97%
AEV(Avian Encephalomyelitis virus)  禽脑脊髓炎病AEV抗体抗氧剂618 试剂
ADAM10/MADM/CD156c  去整合素样金属蛋白酶10抗体1,3-丁二烯溶液 20 wt. % in toluene
ADAMTS12  整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体硅钙 分析标准品
ADH/AVP  抗利尿激素/血管升压素抗体苯灵 分析标准品,99%
Adiponectin Receptor 1  脂联素受体-1抗体苯灵 98%
Adiponectin receptor 2  脂联素受体2抗体野百合 分析标准品
pET-28a(+)载体CAS号:16682-12-5
C5H12N2O2•HC1=168.62
别:BR
含量:≥98.0%
比旋光度:-23.0±2.0 º(C=2 in 5N HCL)
熔点:282~285℃
性状(以下信息仅供参考):白色或类白色结晶性粉末
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途
 

热门标签:pET-28a(+)载体 

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