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pUC19载体

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品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/6/1 21:07:33更新时间:2024/8/21 0:03:05

产品摘要:pUC19载体正在出售的产品:肝素锂对乙酰氨基甲组织科萨基病B(Coxsackievirus B)定量PCR扩增检测试剂盒促胰液素;胰泌素庚烷磺酸钠体液科萨基病B(Coxsackievirus B)定量PCR扩增检测试剂盒麝香草酚戊烷磺酸钠通用型人体鼻

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详细内容

实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。 
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性:
中文名称:pUC19载体
英文名称:Puc19 plasmid
产品规格:20ug
产品货号:GOY-F10937
pUC19是一种常用克隆载体,由pBR322改造而来,含有抗氨苄青基因、 Lac Z基因及与M13mp18相同的多克隆位点。这两个质粒的结构几乎是完全一样的,只是多克隆位点的排列方向相反。重组pUC18/19的克隆转化细胞可用蓝/白斑法筛选。
宿主菌:建议用 E.coli DH5α、JM109及XL1-Blue做受体菌。
储存条件:-20℃
 
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
动物细胞核分离试剂盒50次兔心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒,
细胞微管分离试剂盒10次胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒--动物,人
细胞/组织溶酶体粗提分离试剂盒10次转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒--动物,人
细胞/组织活性溶酶体分离试剂盒10次抗型肝炎病e抗体(HBeAb)ELISA试剂盒--动物,人
细胞/组织高质纯化溶酶体分离试剂盒10次麻疹病IgM(MV IgM)ELISA试剂盒--动物,人
细胞过氧化酶体分离试剂盒10次马尿-L-苯丙氨
细胞溶酶体形态染色试剂盒20次甘草素 Liquiritigenin
纯化溶酶体功能中性红检测试剂盒20次人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA试剂盒,
分离溶酶体纯度双酶法(COX/AP)检测试剂盒20次人β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒,
动物细胞染色体分离试剂盒20次小鼠烟酰腺嘌呤二核苷(NADPH)ELISA试剂盒,
植物细胞染色体分离试剂盒20次小鼠核因子κB亚p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒,
酵母细胞染色体分离试剂盒20次小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒,
细胞/组织高尔体粗提分离试剂盒10次兔子睾酮(T)ELISA试剂盒,
细胞/组织活性高尔体分离试剂盒10次大肠菌素(colicin)ELISA试剂盒--动物,人
细胞/组织高质纯化高尔体分离试剂盒10次Littman 琼脂
Apelin  脂肪炎症因子Apelin抗体色标GStandard for GC,≥99.5% (GC)
Apelin receptor  Apelin receptor抗体二硅烷 98%
APC/Adenomatous Polyposis Coli  腺瘤样息肉抗体3,4-二氟二苯酮 98%
APEX1  多功能DNA修复酶抗体2,4-二肼 ~0.005 M in ethanol, for TLC
ATH III  凝血酶Ⅲ抗体3,3'-二联萘 97%
APG4B/AUTL1  自噬相关蛋白4B抗体2.4-二酚 分析标准品(剧品)
APNG/MPG  N-嘌呤DNA糖化酶O,O-二硫代盐 98%
APOD  载脂蛋白D抗体1-(3-二氨)-3-碳二亚 97%
pUC19载体比旋光度:+20.5~+23.0º
PH值(10%溶液):6.0~8.0
重金属:≤0.001%
水分:10~14%
氯化物:≤0.02%
硫酸盐:≤0.05%
铁盐:≤0.003%
铵盐:≤0.02%
 

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