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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

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pTG-T载体平末端连接试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/6/5 12:08:18更新时间:2024/8/21 0:03:05

产品摘要:pTG-T载体平末端连接试剂盒公司正在热销的产品:巨大戟(标准品)根皮素油菜样品处理试剂盒阿糖尿苷;1-β-D-阿糖呋喃脲嘧啶钩藤碱转基因棉花MON1445品系基因检测试剂盒β-香树素(标准品)钩吻素子转基因棉花MON531品系基因检测试剂盒头孢磺

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详细内容

产品说明书:
本试剂盒适用于PCR产物的克隆,可将PCR产物连接到pTG-T载体上,便于进行下一步实验。DNA段连接是经常出问题的步骤,为了提高连接效率,本试剂盒提供了两种连接Buffer供不同情况选择:10×Ligation Buffer Ⅰ适合置于16℃连接过夜,可获得佳连接效果;2×Ligation Buffer Ⅱ为快速连接Buffer,25℃连接10分钟即可转化,快捷方便。
英文名称:pTG-T Vector Blunt Cloning Kit
产品规格:20次
本试剂盒适用于PCR产物的克隆,可将PCR产物连接到pTG-T载体上,便于进行下一步实验。DNA段连接是经常出问题的步骤,为了提高连接效率,本试剂盒提供了两种连接Buffer供不同情况选择:10×Ligation Buffer Ⅰ适合置于16℃连接过夜,可获得佳连接效果;2×Ligation Buffer Ⅱ为快速连接Buffer,25℃连接10分钟即可转化,快捷方便。
pTG-T是一种高效克隆PCR产物的用载体,它是由一种克隆载体在EcoRV酶切位点处切开,在两侧的3′端添加T而成。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3′端添加一个A,可与pTG-T 3′端的T互补连接,因此可大大提高PCR产物的连接和克隆效率。连接使用的PCR片段3′端应带有A末端,如果是使用pfu等高保真聚合酶扩增的不带A末端的片段,应先加A末端后再连接。
试剂盒中配备了高效率的连接试剂、对照用螺旋质粒和0感受态细胞等,可以方便的连接和转化。带有插入片段的重组子可根据α互补原理,进行蓝白斑筛选,判断载体中有无外源基因的插入(白色克隆为阳性重组克隆,蓝色的为载体自连的克隆,具体筛选原理参考分子克隆等书籍)。克隆后,可使用通用引物T7、SP6进行测序。
保存条件:-20℃保存,避免反复冻融(载体和连接试剂可以适当的分装成小份,防止反复冻融,以保证质量),感受态细胞需要严格的在-70℃冻存,DNA产物纯化试剂盒室温保存
下列是产品的订购信息!
中文名称
英文名称
产品规格
货号
pTG-T载体平末端连接试剂盒
pTG-T Vector Blunt Cloning Kit
20次
GOY-F11055

使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在-70℃温度以下进行。
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
DHPR受体蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次葡聚糖T10
细胞CYP1A2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次人促睡眠肽(DSIP)ELISA试剂盒,DSIP ELISA kit
载玻片细胞CYP1A2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒,TIMP-3 ELISA kit
冰冻切片组织CYP1A2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人抗核仁抗体(ANA)ELISA试剂盒, ANA ELISA kit
石蜡切片组织CYP1A2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人凝血酶(TM)ELISA试剂盒,
载玻片细胞CYP1A2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA试剂盒,
冰冻切片组织CYP1A2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒,
石蜡切片组织CYP1A2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)ELISA试剂盒,
细胞CYP1A2蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒,
细胞CYP1A2蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次鸡白介素4(IL-4)ELISA试剂盒,
CYP1A2蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次嗜盐菌选择性琼脂  用于副溶血性弧菌的选择性分离培养(GB标准)
CYP1A2蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次壳素  Chitin
CYP1A2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次人可溶性间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒,
细胞CYP2B1蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次人白介素16(IL-16)ELISA试剂盒,IL-16 ELISA kit
载玻片细胞CYP2B1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒,Cortisol ELISA
FGF10  成纤维生长因子10抗体孔雀石绿 Biological stain
FGF13  纤维母生长因子13抗体紫 AR
FGFBP  纤维生长因子结合蛋白抗体紫 IND(pH 0.1-2.0)
BFGFR/FGFR1  性成纤维生长因子受体1抗体萘酚绿B ≥80% (HPLC)
Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654)  化性成纤维生长因子受体1抗体1,10-菲罗啉,一水 AR,98%
Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766)  化性成纤维生长因子受体1抗体邻苯二酚紫 IND
FGFR2/CD332  成纤维生长因子受体2抗体邻菲罗啉盐盐 98%
FGFR3/CD333  成纤维生长因子受体3抗体苯酚红 AR
pTG-T载体平末端连接试剂盒铁盐:≤0.003%
重金属:≤0.0015%
砷盐:≤0.00015%
干燥失重:≤0.30%
灼烧残渣:≤0.40%
性状(以下信息仅供参考):白色结晶或结晶性粉末,无臭,无味,溶于酸或碱性溶液中,微溶于沸水,几乎不溶于及丙酮
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)测定氨基酸中氮的标准。制备组织培养基。用米隆反应(蛋白质呈色反应)进行比色定量分析。
保存:RT
 

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