反应五要素:
透明毛圆线虫PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是*末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
以下是透明毛圆线虫PCR检测试剂盒说明书详细介绍:
产品名称:透明毛圆线虫PCR检测试剂盒说明书
英文名称:Trichostrongylus vitrinusPCR
编号:GOY-R10376
需要自备的器材:
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
具有下列特点:1.透明毛圆线虫PCR检测试剂盒说明书 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
我公司即用型PCR试剂盒:
运输及保存:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
本产品是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
加强梭状芽孢杆菌琼脂 (CM0151) Oxoid
Simmons 柠檬酸盐琼脂 (CM0155) Oxoid
毛滴虫培养基基础 (CM0161) Oxoid
脱氧胆酸盐琼脂 (CM0163) Oxoid
培养基基础 (CM0169) Oxoid
液体巯基醋酸盐培养基 (USP) (CM0173) Oxoid
Todd-Hewitt 肉汤 (CM0189) Oxoid
赖氨酸培养基 (CM0191) Oxoid
中国蓝乳糖琼脂 (CM0209) Oxoid
Crossley Milk Medium/Crossley 牛奶培养基 Oxoid500G
脑心浸出液肉汤 (CM0225) Oxoid
脱氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂 (Hynes) (CM0227) Oxoid
胰蛋白示琼脂基础 (CM0233) Oxoid
麦芽汁琼脂 (CM0247) Oxoid
叠氮钠血琼脂基础 (CM0259) Oxoid
过敏测试诊断琼脂 (D.S.T.A.) (CM0261) OxoidCoomassie brilliant blue R250 考马斯亮蓝R250 10g 瓶
Pepsin 1:10000 胃蛋白酶1:10000 25g 瓶
Thymidine 胸腺嘧啶核苷 1g 瓶
2×Pfu PCR MasterMix (不含染料) 5×1ml 瓶
anti-HA Tag Rabbit Polyclonal antibody 100ul 瓶
透明毛圆线虫PCR检测试剂盒说明书小鼠IgG干粉 10mg 支
5×考马斯亮蓝G-250(蛋白定量用) 100ml 瓶
细胞洗涤液 500ml 瓶
Wedelolactone 蟛蜞菊内酯 524-12-9 20mg
Parthenolide 小白菊内酯 20554-84-1 20mg
Cefradine 头孢拉定 1g 瓶
Monensin sodium莫能霉素钠/莫能菌素钠 5g 瓶
Amoxicillin 阿莫西林 5g 瓶
Minocycline hydrochloride 美满霉素 250mg 瓶
Dansyl Chloride 丹磺酰 1g 瓶
Flavourzyme 风味蛋白酶 25g 瓶