肺泡上皮细胞由肺泡I型和Ⅱ型上皮细胞组成,线性分布于肺内99以上的表面积。肺泡I型细胞是一种大而扁平细胞,其稀薄的细胞质延展占据了其内表面积的95以上。它含有水通道,是所有哺乳动物细胞中水渗透性的细胞。肺泡Ⅱ型上皮细胞只占据了2-5
本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成肺细胞。本体系提供了*佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以程度地降低所培养的成肺原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠肺泡上皮细胞细胞培养试剂盒适合于培养人的成肺组织细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM大鼠肺泡上皮细胞细胞组织解离液(3×1ml) (2)大鼠肺泡上皮细胞细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM大鼠肺泡上皮细胞细胞成纤维抑制剂(1ml(500x)) (4)大鼠肺泡上皮细胞组织洗液(5x100 ml) (5)大鼠肺泡上皮细胞细胞生长因子(1ml 500x)及血清(5x10ml) (6)大鼠肺泡上皮细胞细胞基础培养基(5 x100ml) (7)大鼠肺泡上皮细胞组织预备液(1 x100 ml) (8)大鼠肺泡上皮细胞细胞培养试剂盒使用说明书
大鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.大鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
大鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
人葡萄糖氧化酶(GOD)elisa试剂盒 英文名称:Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit规格:96T/48T人B因子(BF)ELISA Kit,48T/96T 特价促销 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 英文名称:Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit规格:96T/48T人抗Q热抗体(anti-Q-Ab)ELISA Kit,48T/96T 进口/国产
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人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒 英文名称:Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit规格:96T/48T人组织多肽抗原(TPA)ELISA Kit,48T/96T 进口/原装
人阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒英文名称:Human Orexin A ELISA Kit规格:96T/48T人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA Kit,48T/96T 特价促销
大鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒英文名称:Human Motilin,MTL ELISA Kit规格:96T/48T人β2糖蛋白1抗体IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA Kit,48T/96T 进口/原装
人β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒英文名称:Human β catenin,β-Cat ELISA Kit规格:96T/48T大鼠种胎儿球蛋白/胎蛋白(AFP)ELISA Kit,48T/96T 特价促销
NEEP21蛋白抗体 英文名称:NEEP21 0.2ml
磷酸化HER4抗体 英文名称:Phospho-HER4 (Tyr1188) 0.1ml
前列腺素脱氢酶1抗体 英文名称:Prostaglandin dehydrogenase 1 0.1ml
磷酸变位酶1抗体 英文名称:PGAM1 0.1ml
磷酸化亲环蛋白(亲环素)PPIG抗体 英文名称:Phospho-PPIG (Ser376) 0.2ml
三磷酸腺苷受体受体P2X1抗体 英文名称:P2RX1 0.2ml
突触后密度蛋白95抗体 英文名称:PSD95 0.1ml
人γ肽P Gamma(Human Peptide Gamma) ELISA Kit 96T
Runx3抗体 英文名称:Runx3 0.1ml
酮酸脱氢酶激酶亚型2抗体 英文名称:PDK2 0.2ml
细胞膜调控蛋白Paralemmin 1抗体 英文名称:Paralemmin 1 0.2ml